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  • 黄芪甲苷基于PI3K/Akt/Bcl-2信号通路对PC12细胞OGD/R损伤的保护机制研究

    作者:张佳琳;李元元;杨文亮;刘富甲;田子夏;谢欣梅;庞晓斌

    目的:探究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对大鼠嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma 12,PC12)细胞缺氧缺糖复供(oxygen deprivation reoxygenation,OGD/R)损伤的保护作用及基于磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)及B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)PI3K/Akt/Bcl-2信号通路的机制研究.方法:体外培养PC12细胞,细胞随机分为空白对照组、模型组(OGD/R),尼莫地平阳性对照组(5μmol·L-1)和黄芪甲苷组(1.00、0.10、0.01μmol·L-1),除空白组外其余各组均建立体外PC12细胞OGD/R模型.CCK-8试剂盒法检测PC12细胞存活率;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒法测定乳酸脱氢酶的漏出量;采用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测各组细胞凋亡与坏死情况;Western blot检测各组细胞Akt、p-Akt、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的蛋白表达情况.结果:黄芪甲苷提高PC12细胞OGD/R损伤的细胞存活率,降低LDH漏出量和细胞凋亡.黄芪甲苷浓度依赖性上调p-Akt/Akt、Bcl-2的蛋白表达和下调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达.PI3K/Akt通路的抑制剂LY2940002能抑制黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞中凋亡相关蛋白的影响.结论:黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞具有保护作用,且其保护作用机制可能与PI3K/Akt/Bcl-2信号通路有关.

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