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流式细胞检测高压CO2对胃癌MMP2和MMP9水平的影响
目的:探讨高压二氧化碳(CO2)对胃癌细胞腹腔侵袭转移能力的影响.方法:体外培养高侵袭力人胃癌MKN45细胞株,在高压CO2(25 mmHg)及不同持续时间(1、2、3 h)干预后,应用流式细胞技术,检测其MMP2和MMP9的表达水平变化.结果:高压CO2作用后胃癌MKN45细胞株MMP2和MMP9蛋白表达有所变化.与常规细胞培养比较,MMP2和MMP9表达差异较为明显(P＜0.001,P＜0.01).结论:CO2对胃癌细胞的侵袭能力会产生一定的影响,高压CO2环境对胃癌细胞的侵袭能力影响较大.
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VIP对裸鼠MKN45移植瘤的影响
目的 探讨血管活性肠肽(VIP)对裸鼠MKN45移植瘤的影响.方法 将18只人胃癌MKN45细胞株的移植瘤裸鼠随机均分为三组,分别每天皮下注射VIP 10 μg·100 μl-1·只-1 (VIP组)、VIP受体拮抗剂[D-p-C1-phe6,Leu17]-VIP(V4380) 10 μg·100μl-1·只1(拮抗剂组)和PBS100μl/只(对照组).每周称量裸鼠体重及移植瘤体积,4周后处死裸鼠,称量移植瘤重量及体积.用免疫组化及RT-PCR检测移植瘤组织中胞外信号调节激酶(ERK)蛋白及mRNA表达的变化.结果 给药第28天,VIP组裸鼠体重明显轻于拮抗剂组(P＜0.05).给药的第14、21天,VIP组移植瘤体积明显小于其它两组(P＜0.01).VIP组ERK蛋白的表达显著低于拮抗剂组(P＜0.05).结论 VIP可能通过抑制肿瘤细胞ERK/NF-κB通路对人胃癌细胞MKN45裸鼠移植瘤有潜在抑制作用.
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吉非替尼对胃癌细胞株放射增敏的作用
背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在绝大部分人类上皮肿瘤中都有表达,其表达高低与放疗抗拒有关.我们检测EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(gefitinib)对高表达胃癌细胞株放射增敏的作用,并初步探讨其机制.方法:Western blot法测定7株人胃癌细胞株(MKN45、SGC7901、SNU-1、N87、AGS、SNU-16、KATO-Ⅲ)中EGFR蛋白的表达,选取2株EGFR相对高表达的胃癌细胞用于后续实验.采用MTT法测定吉非替尼的半数抑制浓度(50%inhibition concentration,IC50),克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线并计算放射生物学参数,流式细胞仪检测吉非替尼联合放疗的凋亡率及细胞周期分布.结果:选取7株胃癌细胞中EGFR表达高的MKN45和SGC7901细胞,发现其存活率均随吉非替尼浓度或放射剂量的增加而明显下降(P＜0.05).MTT法检测吉非替尼对MKN45及SGC7901细胞的IC50分别为0.4mmol/L和0.8 mmol/L.MKN45细胞在0.1×IC50及0.2×IC50剂量下的增敏比(SER)分别为1.102和1.154,SGC7901则为1.092和1.176.吉非替尼或照射均可增加凋亡率,减少S期细胞比例及增加G2/M期细胞比例(P＜0.01).结论:吉非替尼序贯照射应用可提高EGFR高表达胃癌细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布.吉非替尼有望成为EGFR高表达胃癌的放射增敏剂.
关键词： 胃肿瘤 MKN45细胞株 吉非替尼/放射增敏剂 放射敏感性 体外照射
