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微生物发酵生产达托霉素的研究进展
达托霉素是从玫瑰孢链霉菌发酵液中提取出的具环脂肽结构复合物A21978中的一种,是一种酸性脂肽类抗生素.达托霉素属于钙离子依赖性抗生素,在钙离子的存在下它以独特的作用模式破坏细胞膜的完整性,进而扰乱细胞膜对氨基酸的转运,从而阻碍细菌细胞壁肤聚糖的生物合成,终导致细胞死亡.由于其不易产生交叉耐药的问题,因此主要用于治疗耐药菌引起的感染和疾病.
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达托霉素的菌种选育及补料发酵工艺
通过对玫瑰孢链霉菌SIPI-U-16进行亚硝基胍(NTG)诱变以及二甲基硫(DMS)结合链霉素抗性筛选,获得突变株SIPI-D-267,达托霉素产量为520 mg/L.优化了菌株SIPI-D-267发酵过程中癸酸的添加量,结果显示,在5L小罐中培养48 h后,以2.0 ml·(h·L)-1的速度流加癸酸-油酸甲酯(1:1),达托霉素产量提高到1 680 mg/L.
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补加葡萄糖对玫瑰孢链霉菌发酵产达托霉素的影响
以玫瑰孢链霉菌H11生产达托霉素(1).考察了在摇瓶及2.5 L发酵罐中补加葡萄糖对其产量的影响.摇瓶试验结果表明,初始葡萄糖浓度为40 g/L时佳,在对数生长期后期补加20 g/L的葡萄糖,1产量约提高40％,并显著促进菌体生长.在对数生长期和稳定期分4次共补加20 g/L的葡萄糖,1产量提高62％.2.5L发酵罐补料分批发酵结果表明,从发酵12h开始共流加30 g/L葡萄糖,不仅有效延长抗生素的合成期,而且提高了菌体合成抗生素的能力,1产量较分批发酵工艺提高约1.4倍.
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抗肿瘤海洋放线菌LYG-1的筛选及分类鉴定
从连云港海域海泥中分离得到一株具有抗肿瘤活性海洋放线菌LYG-1,通过对其形态特征、培养特征、生理生化特性的研究以及16S rRNA基因序列分析,将海洋放线菌LYG-1归属为链霉菌属玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus的新的海洋变种.利用MTT法对海洋放线菌LYG-1发酵产物的抗肿瘤活性进行了初步研究,结果表明放线菌LYG-1的发酵原液对HepG2、MCF-7、HCT116以及MDA-MB-231 4种肿瘤细胞具有良好的体外抗肿瘤活性.
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玫瑰孢链霉菌补料分批发酵生产达托霉素的动力学模型
目的 研究了玫瑰孢链霉菌补料分批发酵生产达托霉素的动力学特性.方法 将发酵过程分为菌体生长阶段和达托霉素合成阶段,基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程,对达托霉素发酵过程建立了菌体生长、产物生成和总糖消耗的动力学模型,并利用Statistica 6.0软件对模型参数进行非线性拟合.结果 表明模型预测值和实验数据拟合较好,模型能够较好地反映达托霉素补料分批发酵过程.结论 建立的模型能够为高效生产达托霉素提供行之有效的调控策略与手段.
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组合抗性筛选法选育达托霉素高产菌株
目的 利用组合抗性筛选法选育达托霉素高产菌株.方法 以玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus ATCC 11379)为出发菌株,通过在不同浓度梯度的达托霉素和链霉素复合抗性平板上进行抗性筛选.结果 筛选到一株高产达托霉素的突变株D1000-S3-2,经摇瓶发酵验证达托霉素发酵单位可达59mg/L,比出发菌株提高了63.8％.结论 实验证明组合抗性筛选是一种简单高效筛选方法.
