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  • 月经发生中低氧诱导因子-1A对VEGF的调节

    作者:郭士格;南楠;尹德东;周芳;王树芳;刘建兵;贺斌;王介东;徐祥波;陈西华

    目的 在小鼠月经样模型和人蜕膜化子宫内膜基质细胞模拟月经发生基础上,探索低氧诱导因子-1A(HIF1A)对血管内皮生长因子(VEGF)的表达调控作用,以及月经发生中HIF1A对VEGF mRNA表达的调控机制.方法 建立小鼠月经样模型,用ChIP方法检测HIF1A是否直接调控Vegf mRNA的表达;利用HIF1A抑制剂甲氧雌二醇(2ME)抑制HIF1A的功能,检测小鼠月经样模型中HIF1A、VEGF蛋白的表达量;入子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化并模拟月经发生,检测HIF1A与VEGF mRNA的表达;用siRNA敲降的方法抑制HIF1A,检测VEGF mRNA的表达.结果 小鼠月经样模型在孕酮撤退0h,HIF1A结合的Vegf promoter的相对百分比较低,随后在8h和12h逐渐上升,在12h达到峰值(P<0.05);2ME抑制HIF1A入核的同时,抑制了VEGF的表达量(P<0.05);人蜕膜化子宫内膜基质细胞中,孕酮撤退显著上调HIF1A和VEGF mRNA的表达量(P<0.01);敲降HIF1A后,VEGF mRNA的上调受到明显的抑制(P<0.01).结论 在月经发生中,孕酮撤退能够激活HIF1A转录因子的功能,HIF1A被激活后,结合于VEGF promoter区并启动VEGFmRNA的表达.

  • HIF1A与VEGF在小鼠月经样模型的表达与共定位

    作者:庄太凤;陈西华;贺斌;陆超;刘建兵;王树芳;周芳;郭士格;南楠;王介东;徐祥波

    目的 在小鼠月经模型基础上,研究低氧诱导因子(HIF1A)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达与定位,探索HIF1A与VEGF在月经发生中可能的调控机制. 方法 建立小鼠月经样模型,假孕小鼠通过花生油子宫腔注射的方法诱导小鼠子宫内膜发生蜕膜化,切除卵巢致孕酮(P4)撤退以模拟月经的发生.在P4撤退后0、8、12、16、24 h分别收集小鼠子宫;利用免疫组化与Western blot方法检测HIF1A、VEGF的定位与表达量,利用Real-time PCR检测二者mRNA相对表达量;分析HIF1A与VEGF的表达变化趋势与相关性. 结果 P4撤退后,小鼠子宫内膜发生崩解出血,模拟月经发生.免疫组化结果显示,HIF1A蛋白在P4撤退后12、16 h,内膜基质蜕膜细胞核中的表达量逐渐升高;HIF1A表达区域与VEGF表达的区域均集中在子宫内膜蜕膜化区域外周,即崩解组织与基底层交界区域.Western blot蛋白定量结果显示,细胞核中HIF1A蛋白表达量在P4撤退后8、12、16 h显著增高,VEGF在细胞质中的表达量在P4撤退后0、8、12 h较高.HIF1A与VEGF mRNA的表达变化趋势非常相似,即P4撤退后,逐渐升高,在12 h达到峰值,随后逐渐下降. 结论 结果提示月经发生子宫内膜崩解中,HIF1A转录因子功能激活并调节VEGF mRNA的表达.

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