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基因芯片技术分析二氢青蒿素抑制K562细胞增殖的作用机制

姚丽;谢红;靳秋月;呼文亮;陈立军

摘要: [目的]利用基因芯片检测二氢青蒿素作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平探讨二氢青蒿素抑制K562细胞增殖的作用机制.[方法]K562细胞经不同浓度二氢青蒿素处理24 h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化.提取总RNA,逆转录生成cDNA,同时Cy3标记.标记好的cDNA与基因芯片杂交,用扫描仪检测杂交结果.[结果]倒置光显微镜可见细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多.荧光显微镜下可观察到染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块,即凋亡小体,同时有死亡细胞.流式细胞仪检测显示G2期细胞的比例明显增加.扫描杂交结果数据显示其中13条基因表达有差异.表达上调的基因有chk1,表达下调的基因有:PCNA、cyelinB1、cyclinD1、cyelinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA-PK、DNA-TopoI、mcl-1、jnk、VEGF.[结论]二氢青蒿素可以抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡等有关.

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