幽门螺杆菌omp22基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及活性鉴定
摘要： [目的]优化幽门螺杆菌omp22基因工程菌(pMAL-c2X-omp22-TB1)的表达条件,并对目的蛋白进行纯化和免疫活性鉴定. [方法]在不同诱导时机、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间下诱导pMAL-c2X-omp22-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,采用SDS-PAGE方法对表达产物分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性OMP22蛋白进行分离、纯化,对纯化蛋白做Westem blot分析. [结果]工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.3mmol/L)诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的25%以上;经纯化得到了较高纯度(>90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性. [结论]建立了从TB1(pMAL-c2X-omp22)可溶性表达产物中纯化较高纯度OMP22融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌高效表达生产工艺的研究打下了基础.
-
二恶英类化合物的环境污染、毒性及分析方法
1999年1月,比利时、荷兰、法国及德国相继发生严重的畜禽类产品及乳制品二恶英污染事件,随后在一些猪肉和牛肉中也发现了二恶英.除牛肉外,我国从以上四国进口畜禽类及乳制品,包括奶粉、鲜奶、奶酪等.事件发生后,引起世界广泛关注,包括我国在内的各进口国纷纷采取紧急措施,停止进口四国该类产品.因二恶英的毒性大,已成为近年世界发达国家研究多的化合物之一,有的国家不仅建立了专门的网站,随时发布新研究成果,还通过各种媒体对公众宣传二恶英对健康的影响.笔者根据近年世界各国对二恶英的研究成果,从二恶英的环境污染、对人体健康的影响及其分析方法等几方面作一综述.
-
O139霍乱弧菌的毒素和耐药性
O139霍乱弧菌(VCO139)是引起O139霍乱的病原菌,1992年10月19日起源于印度南部城市马德拉斯,几周之内传播到印度其他地区,同年12月孟加拉国出现O139霍乱流行[1].到1993年3月两国报告10多万病人,一千多人死亡,同年泰国、中国、巴基斯坦等国家报告了O139霍乱,在美国等国家和地区出现了输入性O139霍乱病例[2].由于O139霍乱在临床上与EL Tor霍乱无法区分,有些专家甚至担心由于人群缺乏对O139的免疫力,极易发生爆发与流行,甚至有可能引发第八次世界霍乱大流行[3,4].霍乱弧菌产生多种毒素,在构成霍乱弧菌的毒力中起到关键作用,那么,VCO139能产生哪些毒素呢?它的耐药性怎样呢?现将目前有关研究简要总结如下:
-
砷的毒性与生物学功能
关键词： 毒性 -
山东省1997年HIV血清学监测分析
1997年山东省对HIV/AIDS高危人群、重点人群进行HIV血清学检测,共检测57372人份血清标本,检出HIV抗体阳性者4例.其中检测国家级哨点的高危人群血清标本737人份,结果全部阴性.对本省HIV监测网络的高危人群、重点人群检测血清标本56635人份,阳性4份.其中工人1份,女性,为HIV感染者配偶;农民3例(2男,1女),均为有偿供血者.
-
37例梅毒血清学抗体阳性者调查分析
目的:为进一步加强监测,控制梅毒.方法:针对1997年至1999年8月东莞口岸,梅毒血清学检测中发现的梅毒血清抗体阳性37例进行流行病学调查分析.结果:男性35例,女性2例;隐生梅毒者35例,二期梅毒者2例.(30-49)岁26例,50岁以上6例,30岁以下5例.外籍人员3人,中国台湾省籍人员11人,国内出国人员5人,中国国际船员18人.建议:加强入出境人员梅毒监测,加强健康教育,对梅毒患者做好早发现,早诊断,早治疗.
-
女性性乱者淋球菌、人乳头瘤病毒、沙眼衣原体、解脲支原体感染状况的研究
本文采用PCR技术检测了166例女性性乱者宫颈分泌物中淋球菌(NG)、人乳头瘤病毒(HPV)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)四种病原体的感染状况.结果表明:女性性乱者中HPV-DNA的阳性率高,为33.1%,NG-DNA、CT-DNA、UU-DNA的阳性率分别为27.1%、27.1%和14.5%.各种病原体之间存在交叉感染,该人群的混合感染率为24.1%,以NG与HPV混合感染多占25.0%.经流行病学分析,性病感染可能的危险因素为:性生活初始年龄早(＜20岁),性伴数多(≥3)以及流产史等.
-
四川省部分城市性传播疾病流行因素及防制对策初探
-
某职业中专学校乙型肝炎病毒感染情况调查报告
本文以1995年11月库尔勒市职业中专学校289名住校学生为对象,进行HBsAg阳性检测.结果表明:阳性率为13.15%,明显高于新疆地区学生平均水平.经进一步HBV血清标记物检测,发现具有传染性的HBV感染者占15.79%;具有弱传染性的HBV感染者占42.11%.本调查认为:体检部门和单位应严格体检制度,学校应及时复查.
-
恶性疟原虫丝氨酸重复抗原基因在大肠杆菌中的表达
采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)丝氨酸重复抗原基因片段,经基因序列测定后克隆于pGEX-4T-1融合蛋白表达载体,并转化大肠杆菌TG1.SERA基因与pGEX-4T-1重组后能在大肠杆菌TG1中表达一45KDa的融合蛋白,当工程菌OD590为0.8～1.0时,加入终浓度1mmol/L IPTG进行诱导,表达量较高.采用dot-ELISA对表达产物进行鉴定.结果表明SERA融合蛋白能被抗SERA单克隆抗体所识别.
-
谈救灾防病--兴化市1998年大灾之后无大疫的启示
兴化市地处江淮之间的苏北里下河腹部,全境地势低洼,河荡密布,为典型的水网地区.全市总面积2393平方公里,总人口153万,1998年由于降雨强度大,上游客水压境,形成全境内涝.
