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小鼠endostatin基因的克隆与C6鼠脑胶质瘤的治疗

章翔;吴景文;屈延;费舟;高大宽;张剑宁;付洛安;刘卫平;刘先珍

摘要: 目的克隆小鼠endostatin基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗大鼠C6脑胶质瘤.方法从小鼠胶原ⅩⅧ cDNA用PCR法克隆endostatin基因,重组入pUC19,测序后构建非融合表达载体pDH-endostatin,使其在DH5α内经温度诱导表达,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性.经荷瘤大鼠皮下注射该蛋白治疗其脑胶质瘤.结果成功获得551 bp的endostatin基因,经测序正确.该诱导表达蛋白Mr 20000,具有抗血管生成活性.应用该蛋白10或20 mg.kg-1.d-1可抑制荷瘤大鼠脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长.结论 Endostatin基因的表达和初步应用,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质细胞瘤的研究奠定了实验理论基础.

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