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尤文肉瘤细胞总RNA修饰的树突状细胞的体外培养及其鉴定

王剑;桑宏勋;王臻;郭征

摘要: 目的:探讨树突状细胞(DC)经尤文肉瘤细胞总RNA加载后的体外RNA表达情况. 方法:采用分离尤文肉瘤患者外周血单核细胞体外诱导DC,用流式细胞仪检测DC成熟后的表面标志,Trizol法提取患者尤文肉瘤组织总RNA,用总RNA转染DC,用RT-PCR方法检测肿瘤总RNA加载的DC的表达. 结果:经尤文肉瘤总RNA加载的DC表面标记发生明显变化,DC的特异性表面标志如CD40由32.24%增高至72.32%,CD83由17.39%增高至30.97%,而代表单核细胞的CD14则由26.37%下降至10.46%,标志其抗原呈递功能显著增强. RT-PCR测定显示尤文肉瘤中的特异性序列EWS-FLI1可以和引物特异性结合,并且佳结合温度为54℃. 结论:尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC可以呈递肿瘤特异性抗原,并特异性的表达其特有序列EWS-FLI1.

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