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RANTES-K慢病毒载体的构建及其慢病毒的产生和鉴定

孙利;张颖;黄长形;张久聪;连建奇;张野;魏欣;孙永涛;白雪帆

摘要: 目的:构建含cc细胞内趋化因子(CC-intrakine,KANTES-K)基因的慢病毒载体,为研究I型人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染的基因治疗奠定基础.方法:应用PCR技术,扩增目的基因片段RANTES-K,纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6/V5-D-TOPO(R)载体,构建慢病毒载体pLenti6/V5-R-K,并在293FT细胞中建立慢病毒株,后转染HeLa细胞观察RANTES蛋白的表达.结果:成功构建了慢病毒载体plenti6/V5-R-K,并证实RANTES蛋白可在人宫颈癌HeLa细胞系内表达.结论:慢病毒载体可介导CC-intrakine(RANTES-K)基因高效稳定转染HeLa细胞,可用于抗HIV-1感染的基因治疗.

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