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缺氧微环境调控Twist促进人肝癌细胞株SMMC-7721的上皮间质转化

郭莉娜;黄小梅;马燕;李灿;严伟恒;刘漪沦;邓峰美

摘要: 目的 探讨缺氧条件下,Twist基因的表达及其在人肝癌SMMC-7721细胞株上皮间质转化中的作用机制.方法 模拟缺氧微环境,分别在常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下培养SMMC-7721细胞24 h.在倒置光学显微镜下检测SMMC-7721细胞形态学的改变;RT-PCR和Western blot法检测细胞中HIF-1α、Twist、上皮表型标记蛋白E-cadhefin及间质表型标记蛋白Vimentin的表达;Transwell小室侵袭实验检测缺氧条件和常氧条件下细胞侵袭能力的变化.使用Twist1靶向siRNA抑制其表达后,进一步采用RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力变化.结果 在缺氧模拟条件下,人肝癌SMMC-7721细胞中Twist基因表达水平显著升高,同时细胞发生上皮-间质转化和侵袭能力增强.靶向沉默Twist基因后,低氧诱导的上皮间质转化过程被逆转,同时细胞侵袭能力显著减弱.结论 低氧条件下Twist基因异常激活,进而促进SMMC-7721细胞上皮-间质转化的发生和侵袭能力的增强.

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