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沉默ADAM17蛋白对人结肠癌HT29细胞增殖能力的影响及机制探讨

张琪;杨光华;刘少鹏;丁家杉;韩学超;张国志;王长友

摘要: 目的 观察沉默解整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)表达对结肠癌HT29细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制.方法 将HT29细胞分为3组,沉默组和阴性对照组分别转染ADAM17小干扰RNA(ADAM17-shRNA)及对照序列(nonsense shRNA),空白对照组加入等量PBS;转染后48 h,采用real-time PCR法检测细胞ADAM17mRNA,CCK-8法观察细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21.结果 转染48 h,与阴性对照组和空白对照组比较,沉默组细胞ADAM17 mRNA及蛋白表达减少,细胞增殖率下降,G0/G1期细胞比例增多,G2/M期细胞比例降低,cyclin D1蛋白表达降低,p21蛋白表达升高(P均<0.01).结论 沉默ADAM17蛋白可抑制结肠癌HT29细胞增殖,可能与其影响细胞周期蛋白cyclin D1、p21表达从而调控细胞周期有关.

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