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花色苷对膀胱癌细胞凋亡因子及蛋白Caspase-3的表达影响观察
目的 探讨花色苷对膀胱癌细胞凋亡因子和蛋白Caspase-3表达的影响.方法 利用PI染色流式细胞术和Western Blotting测定不同浓度花色苷对膀胱癌细胞凋亡因子和蛋白Caspase-3表达的影响.结果 各浓度花色苷诱导膀胱癌细胞的凋亡率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);各浓度的花色苷对蛋白Caspase-3的表达率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 花色苷可诱导膀胱癌细胞发生凋亡,作用机制与Caspase-3蛋白表达升高相关.
关键词： 花色苷 膀胱癌细胞 凋亡因子 蛋白Caspase-3 -
红景天苷对低氧诱导大鼠海绵体平滑肌细胞凋亡的抑制作用
目的:探讨红景天苷对低氧诱导的大鼠海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)凋亡的影响. 方法:采用酶消化法体外培养大鼠CCSMCs,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白(Desmin)免疫荧光鉴定CCSMCs纯度;通过MTT法筛选红景天苷无毒剂量;以低氧混合气体(1％O2,5％ CO2,94 ％N2)通入缺氧小室建立细胞低氧模型;细胞分为3组:正常组,低氧组,红景天苷(32μg/ml)干预组,采用流式细胞术观察各组CCSMCs凋亡的情况,Western印迹检测caspase-3蛋白表达水平. 结果:成功培养大鼠CCSMCs,免疫荧光显示绝大部分细胞α-SMA、Desmin阳性;≤32 μg/ml的红景天苷对细胞无明显的毒性;低氧组CCSMCs早期凋亡[(18.69±1.29)％]较正常组[(12.77±1.41)％]明显增多(P＜0.01),低氧组晚期凋亡[(21.03±1.53)％]较正常组[(14.63±2.00)％]亦增加(P＜0.05),同时,活化型caspase-3蛋白表达上升(P ＜0.01);32 μg/ml红景天苷剂量下可有效降低低氧诱导的CCSMCs早期凋亡率[(13.46 1.87)％](P＜0.01),活化型caspase-3蛋白表达下降(P＜0.01). 结论:红景天苷能够降低低氧诱导的CCSMCs活化型caspase-3蛋白的表达,抑制了低氧诱导的CCSMCs凋亡.
关键词： 红景天苷 低氧 海绵体平滑肌细胞 凋亡 蛋白Caspase-3 -
5-脱氧杂氮胞苷对HepG2肝癌细胞恶性表型及caspase-3和bcl-2表达的影响
目的观察5-脱氧杂氮胞苷(5-aza-CdR)对HepG2细胞株生长抑制和凋亡的影响.方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;通过Giemsa染色观察细胞贴壁克隆形成率;用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学方法检测caspase-3和bcl-2蛋白的表达变化.结果 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞株生长,并呈剂量依赖性,第4天时的抑制率大,可达60.2%,细胞贴壁克隆形成率从36.3%下将至17.3%;流式细胞术结果表明8 μmol/L 5-aza-CdR作用第4天凋亡率为10.26%,与对照相比差异有统计学意义;caspase-3蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白表达则明显下调.结论 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞增殖并能促进凋亡,其机制可能是通过恢复某些抑癌基因表达,上调caspase-3蛋白并下调bcl-2蛋白表达.
关键词： 肝肿瘤 5-脱氧杂氮胞苷 HepG2 蛋白Caspase-3 蛋白Bcl-2
