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恶性肿瘤病人化疗的护理
化疗是治疗恶性肿瘤的主要手段.不过,抗肿瘤药物在体内杀伤肿瘤细胞的同时,对增殖旺盛的正常细胞,如造血系统、胃肠黏膜上皮、生发细胞等都有影响,并且在出现疗效的同时,常伴有不同程度的毒性反应.
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鼠细粒棘球蚴囊壁消化残片的生发细胞培养试验
目的 建立高效、经济的细粒棘球蚴生发细胞原代培养方法.方法 采用0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化鼠细粒棘球蚴囊壁10～30 min,以消化后的棘球蚴囊壁残片进行组织贴壁培养原代生发细胞,以单纯组织贴壁培养法作为对照.用倒置显微镜观察生发细胞形态学动态变化,绘制生长曲线.免疫荧光试验鉴定获得的生发细胞.取残片培养的生发细胞进行小鼠腹腔返种,4个月后剖检小鼠,观察小鼠感染情况;取病变组织制石蜡切片、HE染色后,镜下观察棘球蚴囊壁生长情况.结果 0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化10 min囊壁残片中的生发细胞的完整性好,胞浆丰富,2～4d后囊壁残片边缘游离出生发细胞,生发细胞培养9d后呈现集落样生长状态.0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化20 min、30 min的囊壁残片中的生发细胞破碎并出现裸核.采用0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化10 min的残片培养法培养生发细胞的成功率(6/10)高于单纯组织贴壁法(3/10);两种方法生长曲线均近似“S”形,残片培养法周期较短(18 d),残片培养法培养的生发细胞生长增殖水平高于单纯贴壁培养法(P＜0.01).免疫荧光结果显示,残片培养法培养18 d的生发细胞可被感染棘球蚴的人阳性血清中的抗棘球蚴抗体识别.残片培养法培养的生发细胞返种结果显示,小鼠腹腔有新生的棘球蚴囊状结构出现.HE染色结果显示,镜下可观察到发育中的棘球蚴囊壁角质层和生发层.结论 建立的0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化10 min的鼠源棘球蚴囊壁残片贴壁培养法可培养出活性正常的生发细胞,并能感染小鼠.
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三维适形调强放疗对鼠骨细粒棘球蚴生发细胞凋亡及caspase-3表达的影响
目的 探讨三维适形调强放疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)的放射线对鼠骨细粒棘球蚴生发细胞生长及凋亡的影响.方法 骨细粒棘球蚴病子午沙鼠20只,将骨细粒棘球蚴内囊中的生发细胞进行分离,并进行体外培养,对体外培养成功的骨细粒棘球蚴生发细胞分为IMRT放疗组和空白对照组.IMRT放疗组给予总剂量为40 Gy的IMRT放疗,对照组仅给予假照射.于放疗结束24 h后采用流式细胞仪检测骨细粒棘球蚴生发细胞凋亡率,采用Western blot法检测骨棘球蚴生发细胞中凋亡相关蛋白caspase-3蛋白表达情况,采用RT-PCR法定量检测骨棘球蚴生发细胞caspase-3 mRNA表达水平.结果 IMRT作用24 h后,IMRT放疗组骨细粒棘球蚴生发细胞凋亡率、caspase-3蛋白及mRNA表达灰度值((67.21±14.40)％、7.761±1.447、59.44±19.28)明显高于对照组((2.91±0.51)％、0.129±0.054、1.17±0.50),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 IMRT对骨细粒棘球蚴生发细胞生长有明显诱导凋亡作用,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白caspase-3而实现的.
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三维适形调强放疗对骨细粒棘球蚴生发细胞生长及凋亡影响的实验研究
目的观察三维适形调强放疗（IMRT）对鼠骨细粒棘球蚴生发细胞生长及凋亡的影响，探讨三维适形调强放疗治疗骨棘球蚴病的临床效果。方法选取骨细粒棘球蚴病大鼠，将骨细粒棘球蚴内囊中的生发细胞进行分离，并进行体外培养，将体外培养成功的骨细粒棘球蚴的生发细胞分为 IMRT放疗组及空白对照组。IMRT放疗组给予总剂量为40 Gy的 IMRT放疗，空白对照组只给予假照射作为阴性对照。于放疗结束24 h后，采用MTT法检测 IMRT对骨细粒棘球蚴生发细胞生长的抑制作用，Hoechst 33258荧光染色观察 IMRT对骨细粒棘球蚴生发细胞凋亡的影响，观察 IMRT对鼠骨细粒棘球蚴病的治疗效果。结果 IMRT作用24 h后，MTT法检测结果可观察到，IMRT放疗组的骨细粒棘球蚴生发细胞吸光度（OD值＝0．213±0．070），远低于空白对照组的（0．792±0．098），差异有统计学意义（P ＜0．05），存在明显的增殖抑制现象；Hoechst 33258荧光染色可观察到 IMRT治疗组的骨细粒棘球蚴生发细胞呈致密浓染的强蓝色荧光，存在明显的核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象，而空白对照组未出现。结论 IMRT对骨细粒棘球蚴生发细胞生长具有明显的抑制作用并可诱导生发细胞凋亡。
