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彗星试验分析指标的进展和应用
彗星试验(comet assay)也叫单细胞凝胶电泳技术(single cell gel electrophoresis),是由Ostling[1](1984)首次提出,是一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的方法.彗星试验一般只需几千个细胞,适用于任何可制成单细胞悬液的真核细胞,所需设备简单,试剂花费少且易得,而且快速、灵敏,从采样到结果分析只需数小时,整个过程可在1个工作日内完成,每109个相对原子质量DNA分子中可检测出0.1个DNA断裂.由于以上优点,彗星试验已被广泛应用于生物学、临床和毒理学等科研领域[2].
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应用单细胞凝胶电泳检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的关系
目的:探讨应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的一般规律,为早期死亡时间的推断提供新的方法.方法:建立大鼠死亡模型,在死后27 h内,每隔3 h取脾组织样本进行单细胞凝胶电泳,用共聚焦显微镜摄取彗星图像,应用彗星图像分析软件(IMI1.0)进行图像分析,并作统计学分析.结果 :大鼠死后,脾细胞在电泳图像上出现了明显的彗星形拖尾,其尾长(TL)、尾矩(TM)在一定的时间范围内(0~15 h)随死亡时间的延长而逐渐增大,二者均与死亡时间(PMI)呈现一定的相关回归关系.结果:单细胞凝胶电泳技术可应用于早期死亡时间的推断;彗星图像分析软件为SCGE的结果分析提供了便利.