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NADPH-细胞色素P450还原酶文献资料
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肝脏P450还原酶特异性敲除小鼠模型在毒理学中的应用
微粒体细胞色素P450单加氧酶(P450,CYP)在内外源性化合物的生物转化中起着重要的作用.P450酶蛋白种类的多样性及其底物的重叠性使P450酶系可以催化多种类型的反应,不仅对许多外来物质,如药物等具有代谢作用,还参与一些内源性物质,如激素、脂肪酸等的代谢.
关键词: NADPH-细胞色素P450还原酶 基因敲除 器官毒性 -
重组NADPH-细胞色素P450还原酶在大肠杆菌中的表达和纯化
目的在大肠杆菌中表达重组NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白.方法将已构建的NADPH-细胞色素P450还原酶重组质粒pMW172a-CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL-21中,依次使用超速离心、DE52 纤维素阴离子交换层析和2′-5′ADP亲和层析的方法纯化CPR,并检测酶的活性.结果获得了纯度达99%以上的可溶性CPR蛋白,纯化倍数5.20倍,检测酶的比活性为每分钟1 045.49nmol/mg.结论获得了纯度高、有活性的CPR蛋白,可作为工具酶用于某些相关酶的研究,同时也为CPR的工业纯化提供了可行的参考路线.
关键词: NADPH-细胞色素P450还原酶 大肠杆菌 表达 纯化