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IL-1β诱导软骨细胞培养金属蛋白酶/金属蛋白酶抑制剂水平及药物对其影响
目的探讨体外培养的原代软骨细胞及加入白细胞介素(IL)-1β诱导软骨细胞中金属蛋白酶/金属蛋白酶抑制剂水平变化及四环素、强力霉素及中药骨碎补对其影响.方法采用体外培养的兔软骨原代细胞为模型,分别加入含有10%四环素、强力霉素及骨碎补含药血清,实验组加入10 ng/ml IL-1β,诱导软骨细胞变性,均培养48 h分离上清液,采用酶联免疫方法测定各组培养液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)含量.结果经10 ng/ml IL-1β诱导后,软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平显著性升高(P<0.01);对于加入IL-1β诱导的软骨细胞,与空白血清对照组比较,含骨碎补药物血清和含强力霉素药物血清均降低软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平,且强力霉素含药血清组与空白对照组比较差异具有显著性(P<0.01),而含四环素药物血清则升高软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平,但与空白对照组比较差异无显著性(P>0.05);对于不加IL-1β诱导的软骨细胞来说,3种含药血清均可升高软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平,且含骨碎补药物血清和含四环素药物血清与空白对照组比较差异均有显著性(P<0.01).结论 IL-1β可上调体外培养的原代软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平,强力霉素和骨碎补可以下调经IL-1β诱导的软骨细胞MMP-3/TIMP-1水平.
关键词: 基质溶解素1 金属蛋白酶类组织抑制剂1 软骨细胞 -
大鼠佐剂性关节炎中MMP3、MMP9、MMP13及TIMP-1的mRNA表达
目的研究大鼠佐剂性关节炎模型中爪部跖趾关节及膝关节的软骨及滑膜中的基质金属蛋白酶类(MMP3、MMP9、MMP13)及金属蛋白酶类组织抑制剂1(TIMP-1)在不同时期的表达情况.方法制作大鼠佐剂性关节炎模型25只,分别于造模第1,2,5,7,9周各处死5只.取注射足(患爪)的跖趾关节和同侧膝关节的软骨及邻近滑膜,用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)的方法检测基质水解酶1(MMP3)、明胶酶B(MMP9)、胶原酶3(MMP13)及TIMP-1的mRNA表达,同时取患侧爪部跖趾关节和膝关节软骨行病理切片检查.结果造模第1、2周,患爪的软骨及滑膜中MMP3、MMP13均有表达,且MMP3相对表达水平较MMP13高,第5周MMP3尚有表达,MMP13未测到表达,第7周MMP3,MMP13均无表达.患爪滑膜及软骨中TIMP-1直到第7周才测到表达,MMP9表达不稳定.膝关节可以测到TIMP-1,各时间段均未测到MMP3、MMP9及MMP13的表达.病理光镜下第9周患爪部跖趾关节滑膜可见炎性反应,膝关节软骨无明显改变.结论结果提示MMP-TIMP1的平衡关系紊乱可能在软骨破坏过程中起重要作用.
关键词: 佐剂性关节炎 基质金属蛋白酶类 金属蛋白酶类组织抑制剂1