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环氧合酶-2抑制剂与肾脏
非甾类抗炎药(NSAIDs)的主要作用是抑制环氧合酶(COX).COX有两种同工异构体COX-1和COX-2.COX-1是一种"看家酶",它对机体的内稳定起着重要作用.COX-2是一种诱导酶,是引起炎症反应的关键酶.COX-2特异性抑制剂明显地减少胃肠道副作用,但近来发现COX-2在一些脏器中也有生理性表达.NSAIDs对肾的不利影响如急性缺血性肾功能衰竭、电解质紊乱、肾乳头坏死,都与它抑制COX有关.因此COX-2特异性抑制剂的肾安全性成了人们关注的热点.现就COX-2抑制剂对肾的影响作一综述.
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人晶状体上皮细胞系细胞膜Ca2+-ATPase同工异构体2的表达
目的检测人晶状体上皮细胞系B-3(HLE B-3)中,细胞膜钙ATP酶(PMCA)的同工异构体之一,PMCA2的表达情况.方法细胞培养HLE B-3,当细胞培养达90%融合时,提取其总mRNA,用PMCA2特异性引物,用反向聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA2在mRNA水平上的表达.提取细胞膜蛋白,经SDS-PAGE电泳以及蛋白免疫印记法(Western blot),用抗-PMCA2的特异抗体检测其在蛋白质水平上的表达.结果RT-PCR显示PMCA2特异性引物在HLEB-3细胞扩增出唯一550 bp的片段.蛋白免疫印记法证实PMCA2的表达,相对分子质量约为126 000.结论HLE B-3细胞中,在mRNA水平以及蛋白质水平均有PMCA2的表达.并有可能在HLE B-3细胞的钙离子平衡调节中发挥重要作用.
关键词： 人晶状体上皮细胞 细胞膜Ca2+-ATPase 同工异构体 -
人膀胱逼尿肌肌球蛋白的表达及体外功能研究
目的:探讨平滑肌(SM)肌球蛋白(SMM)及非肌肌球蛋白(NMM)在人膀胱逼尿肌中的表达及功能.方法:人膀胱逼尿肌标本(n=13)来自于武汉大学中南医院心脏死亡患者捐献的、病理证实为正常膀胱逼尿肌组织的标本;Organ Bath检测膀胱逼尿肌收缩和舒张特性;竞争性RT-PCR检测SMM同工异构体(SM-A/-B,肌球蛋白轻链MLC17a/b和SM1/2)的表达;Western Blot和免疫荧光染色对膀胱SMM重链(MHC)和NMM重链的三种同工异构体(NA,NB和NC)进行检测并定位.结果:Carbachol可以显著诱导膀胱逼尿肌收缩,表现为典型的时相收缩特性;膀胱逼尿肌表达约20％ SM-B,70％ MLC17a和45％ SM2;此外,NMM重链的三种同工异构体(NA,NB和NC)广泛存在于膀胱SM和内皮细胞中,而MHC则仅表达在膀胱及血管SM中.同时,肌球蛋白选择性抑制剂Blebbistatin可以显著舒张苯肾上腺素预收缩的膀胱逼尿肌.结论:SMM及NMM同工异构体在膀胱逼尿肌收缩舒张中可能起到重要的作用.
