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不同pH值对人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5生长的影响
目的 在不同pH值培养液中培养人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5),观察其生长情况,选出有利于MRC-5细胞生长的pH值范围.方法 采用细胞培养技术,分别在pH值为6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6的培养液中培养MRC-5细胞,通过显微技术观察细胞形态、对细胞进行计数,然后对MRC-5细胞的生长情况进行分析比较.结果 在不同pH值的培养液中,MRC-5细胞的生长状况不同,细胞数量和细胞形态都有差异,当培养液的pH值为7.2-7.3时,细胞生长形态好,细胞数量高可达2.37×106/ml.结论 研究表明,培养液的pH值为7.2-7.3时,MRC-5细胞的生长状况佳.
关键词： 人胚肺二倍体成纤维细胞 MRC-5 pH值 细胞培养 -
银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞氧化应激的保护作用
目的 探讨银杏提取物(EGb)对体外培养的人类成纤维细胞的抗氧化作用.方法 分别于常态氧(氧浓度为21%)及高氧(氧浓度为40%)环境下培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),并给予不同浓度(0,7.5,15,30,60 μg/ml)的EGb,以400 μmol/L的α-苯基-N-4-丁基硝酮(PBN)为阳性对照,观察不同条件下细胞的生长曲线,并用流式细胞仪测定不同时期、不同条件下MRC-5细胞内活性氧(ROS)的含量.结果 常规培养条件下,MRC-5在不同浓度EGb下的生长曲线无明显差别,不同时期测定的ROS含量与阴性或阳性对照比较,总体上无显著差异;而在高氧环境中,使用EGb的MRC-5细胞生长绝对数明显比空白对照多,且呈现EGb浓度越高,细胞绝对数越多、不同时期ROS含量越低、衰老细胞越少的趋势.结论 银杏叶提取物对慢性氧化应激下的MRC-5有保护及抗衰老作用.
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噬菌体展示技术筛选MRC-5细胞上人巨细胞病毒的结合位点
目的 以人巨细胞病毒(HCMV)感染的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)为靶细胞,寻找参与HCMV识别并结合细胞的多肽区域,研究HCMV膜蛋白中哪些功能域参与细胞识别以及膜融合过程.方法 以HCMV感染阳性的MRC-5细胞为液相筛选物,从随机七肽噬菌体展示库中筛选出能够与感染阳性MRC-5细胞特异性结合而与正常细胞不结合的噬菌体配体.通过ELISA分析亲和力、DNA测序、序列对比及理化性质分析多肽.结果 初步发现EVNMSDS、NVSVFET和GQQPTTV 3个肽段可能参与HCMV与宿主细胞的识别过程.同时通过同源比对分析还发现,这3个七肽与HCMV gB和gH蛋白存在共有序列.结论 应用PHD7噬菌体随机肽库和生物信息学方法 筛选出3个可能参与HCMV识别宿主细胞并进行膜融合的功能域,为进一步研究HCMV感染宿主细胞的具体机制提供新的思路以及为抗HCMV感染提供新的策略.
