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  • 重组人类抗砷相关基因在大肠埃希菌的表达

    作者:何玲;潘泽民;谭晓华;袁红琳;刘仁海;杨磊

    目的构建含重组人类抗砷相关基因(human arsenic resistence related gene,hARRG)的表达载体,诱导其在转化菌表达,分离纯化表达蛋白,研究该蛋白质的理化性质、抗砷功能和免疫活性,深入研究人类对砷化物的抵抗作用.方法将hARRG cDNA开放阅读框亚克隆到原核表达载体Pet11C中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白质,利用阴离子交换柱Sepharose纯化蛋白质,SDS-PAGE胶电泳观察结果.结果将hARRG cDNA成功亚克隆到原核表达载体Pet11C中,并成功在大肠杆菌中表达,表达的hARRG蛋白占菌体蛋白的5%左右,该蛋白质被分离纯化.结论原核表达载体Pet11C可以在大肠杆菌中表达hARRG cDNA,可用阴离子交换柱Sepharose纯化抗砷相关蛋白质.

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