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微囊藻毒素-LR致小鼠肝、肾和睾丸细胞 DNA-蛋白质交联的研究
目的 探讨微囊藻毒素-LR所致小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联(DPC)作用.方法 以昆明种雄性小鼠为实验对象,腹腔注射染毒,采用KCl-SDS沉淀法检测小鼠肝、肾、睾丸细胞中交联DNA和游离DNA的量,计算其DPC系数,DPC系数=交联DNM/(交联DNA+游离DNA),判断DNA与蛋白质的交联程度.结果 在小鼠肝细胞中,微囊藻毒素-LR各染毒组DPC数量均有显著增加,其DPC系数与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05).在小鼠肾细胞中,微囊藻毒素-LR染毒剂量为3μg/kg bw和6μg/kg bw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P＜0.05);染毒剂量为12μg/kg bw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).在小鼠睾丸细胞中,染毒剂量为3μg/kg bw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P＞O.05).染毒剂量为6μg/kg bw和12μg/kg bw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).结论 在一定的染毒剂量下,微囊藻毒素-LR可以引起小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联.
关键词： 微囊藻毒素-LR KCl-SDS沉淀法 DNA-蛋白质交联 器官 染毒 -
液态甲醛致小鼠肝和睾丸DPC研究
目的 检测甲醛致小鼠DPC的损伤.方法 采用KCl-SDS沉淀法来检测液态甲醛染毒后小鼠肝和睾丸中DNA-蛋白质交联的形成及修复情况.结果 采用20.0mg/kg的甲醛染毒小鼠,6h组肝细胞内DPC系数没有明显增加(P＞0.05),12h组肝细胞内DPC系数相对空白组明显增加(P＜0.05),18h组肝细胞内DPC系数达到高,且与空白组有极显著差异(P＜0.01),24h组肝细胞内DPC系数降低,且与空白组比较没有显著性差异;经过20mg/kg的甲醛染毒后,6h、12h和18h组睾丸细胞内DPC系数相对于空白组都有极显著性增加(P＜0.01),24h组睾丸细胞内DPC系数与18h组相比显著降低,且与空白组比较没有显著性差异.结论 较高浓度的液态甲醛能够引起小鼠肝脏和睾丸形成DNA-蛋白质交联,且所形成的DNA-蛋白质交联在24h内能够完全修复.
关键词： 液态甲醛 KCl-SDS沉淀法 DNA-蛋白质交联 修复 -
甲醛致大鼠肝细胞DNA-蛋白质交联的研究
目的 探讨甲醛致生物机体DNA-蛋白质交联(DNA-Protein crosslinks,DPC)作用.方法 研究以Wistar大鼠肝组织为实验材料进行体内和体外实验,采用KCl-SDS沉淀法来检测甲醛染毒后大鼠肝细胞DNA-蛋白质交联的含量.结果 低浓度的气态甲醛(0.5 mg/m3)不能引起DNA-蛋白质的交联,较高浓度的甲醛(1.0mg/m3,3.0mg/m3)可以诱导明显的DNA-蛋白质交联作用(P<0.01);体外实验结果显示:经低浓度甲醛(12.5μmol/L)处理1h后,大鼠肝细胞内的DPC系数稍有变化,但与空白对照组相比无显著差异,而随着甲醛浓度上升,细胞中的DPC含量出现了显著性上升.结论 体内和体外实验表明:低浓度的甲醛不能引起DNA-蛋白质的交联,而较高浓度的甲醛可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用.
关键词： 甲醛 KCl-SDS沉淀法 DNA-蛋白质交联 -
邻苯二甲酸二乙基己酯致小鼠不同器官细胞 DNA-蛋白质效应研究
目的 为了探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)导致生物机体内不同器官DNA-蛋白质的交联(DPC)作用.方法 以采用KCl-SDS沉淀法来检测DEHP体外染毒后昆明纯系小鼠体内肝、脑、睾丸、肺等4个器官的细胞中DNA-蛋白质交联含量.结果 当DEHP的浓度为5μM时,小鼠肝细胞的DPC系数与对照组相比没有发生显著的变化;当DEHP的浓度分别升高到10、20、40和80μM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异;在脑细胞中,当DEHP的浓度分别为5、10 μM时,能显著诱导DPC的生成(P＜0.05),但是,随着DEHP的浓度升高,DPC的含量与对照组相比没有显著性差异;在睾丸的细胞中,当DEHP的浓度为5 μM时,小鼠睾丸的细胞DPC系数与对照组相比有显著的升高(P＜0.05);当DEHP的浓度升高到10、20、40、80uM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异(P＜0.01);在肺细胞中,DEHP的浓度为5 μM时,就能显著诱导DPC的生成(P＜0.05).结论 DNA-蛋白质交联是一种严重的DNA损伤,DEHP可诱导DNA-蛋白质交联的产生.
