您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
GSTA1 RT-PCR 克隆 序列测定 表达 Western blot文献资料
-
人谷胱甘肽硫转移酶A1原核表达系统的构建及高效表达
目的 对人谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)原核表达系统的构建及高效表达.方法 采用RT-PCR方法 将肝组织中提取总RNA扩增人GSTA1基因的cDNA序列,将其插入到原核表达载体pET30a多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法 对重组质粒进行鉴定,并进行了高效表达.结果 人GSTA1克隆到原核表达载体pET30a多克隆位点中,测序结果 同Genbank GSTA1(GI:22091453)cDNA序列相比较,在512位点T→C,氨基酸由Met→Thr,同源性为99%,基因登陆号为AY532928.通过IPTG诱导表达,在34.4KDa处1、2、3、4小时的表达量分别为41.8%、68%、68.3%、83%.结论 经Western blot分析,证实GSTA1基因在原核表达系统中有蛋白质表达.
