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聚合酶链反应 Bt-176玉米 Round-up Ready 大豆(RR大豆) 基因修饰物质文献资料
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利用聚合酶链式反应方法检测转基因大豆和玉米中的基因修饰物质
采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction PCR)来检测转基因大豆(RR大豆)和玉米(Bt-176玉米)中基因修饰物质(Genetically Modified Organisms GMOs)的方法.利用已知GMOs准确含量的转基因大豆和玉米对PCR检测方法进行了探讨,检测限可以达到0.1%,即,可以把食品中含量仅为0.1%的GMOs检测出来,检测为定性检测.检测的步骤包括:(1)大豆和玉米基因组DNA的提取;(2)对转入的CaMV35s启动子和NOS终止子利用PCR方法进行扩增;(3)对食品的house-keeping基因进行PCR扩增,以确定我们所检测的食品确实来自于大豆和玉米;(4)利用琼脂糖凝胶电泳及XmnI限制性内切酶方法对PCR产物进行描述与确认.RR大豆含有CaMV35s启动子和NOS终止子,而Bt-176玉米只含有CaMV35s启动子.由于玉米的淀粉含量较高,因此其基因组DNA的提取效果不如大豆,终的电泳图谱也不如大豆的清晰.
