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红景天苷对人肺动脉内皮细胞线粒体ROS及细胞分泌功能的影响
目的:研究红景天苷对氧化应激下人肺动脉内皮细胞线粒体ROS及细胞分泌功能的影响及其分子机制.方法:应用香烟烟雾提取液(CSE)诱导人肺动脉内皮细胞(hPAE)生成ROS,红景天苷干预hPAE,ELISA检测CES诱导、红景天苷干预的hPAE合成的NOS、ET-1、VGGF的变化,DCFH-DA、Rh123法分别检测线粒体ROS、线粒体膜电位的变化.结果:CSE组线粒体ROS的DCFH-DA的荧光强度高于生理水组,NOS、ET-1和VEGF的合成高于CSE+红景天苷组、生理盐水组;CSE组的线粒体的膜电位高于CSE+红景天苷组和生理盐水组;CSE+红景天苷组的线粒体ROS的DCFH-DA和DiBAC4的荧光强度低于CSE组,而与生理盐水组接近.结论:红景天苷可抑制CSE诱导的人hPAE线粒体ROS的生成,恢复线粒体的膜电位,降低NOS、ET-1和VEGF的合成,从而保护氧化应激下hPAE细胞的分泌功能.
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康妇炎胶囊调节衣原体感染的中性粒细胞的活性
目的 观察康妇炎胶囊对衣原体感染的中性粒细胞(PMN)活性的影响,研究其杀菌消炎机理.方法 分离大鼠外周血PMN,衣原体感染6 h后予以10 ng/mL(K-10 ng组)、10 mg/mL(K-10μg组)、1 mg/mL(K-1 mg组)康妇炎胶囊处理6 h、12 h、24 h后,分别收集培养液和细胞分析活性氧簇(ROS)、髓过氧化物酶(MPO)和衣原体载量.利用TLR2/4激动剂或抑制剂,分析康妇炎胶囊影响PMN活性的分子机理.结果 康妇炎处理衣原体感染的PMN后,显著降低细胞内ROS(K-1 mg:6 h P=0.00003、12 h P=0.000001、24 h P=0.000003;K-10 mg:6 h P=0.014、12 h P=0.009、24 h P=0.009;K-10 ng:24 h P=0.0005)和MPO(K-1 mg:6 h P=0.046、12 h P=0.004、24 h P=0.038;K-10μg:12 h P=0.048、24 h P=0.011;K-10 ng:12 h P=0.005、24 h P=0.017)水平,显著降低培养液中衣原体载量(K-10 ng:P=0.0002;K-10μg:P=0.0001;K-1 mg:P=0.002).相比于康妇炎组,TLR4抗体与康妇炎同时作用于细胞,显著抑制PMN分泌MPO(P=0.011);TLR2和TLR4激动剂分别与康妇炎作用细胞,培养液中衣原体负荷量显著降低(PGN:P=0.002;LPS:P=0.00008).结论 康妇炎胶囊通过抑制PMN产生和分泌ROS和MPO,促进PMN吞噬衣原体,调节PMN的杀菌方式,减少脱颗粒物如ROS、MPO的产生,促进对病原菌的吞噬,减少因PMN脱颗粒释放ROS和MPO到细胞外引起组织损伤,但其调节PMN杀菌方式的分子机理与TLR2/4信号通路不重叠.
关键词: 中性粒细胞 康妇炎胶囊 活性氧族(ROS) 髓过氧化物酶(MPO) 吞噬