首页 > 文献资料
-
重楼皂苷I对鼻咽癌CNE-2细胞体外放射敏感性的影响
目的:探讨重楼皂苷I(PPI)对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用及可能机制.方法:MTT法检测PPI对CEN-2细胞增殖抑制作用.克隆形成实验检测PPI对CNE-2的放射增敏效应,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比.流式细胞仪检测PPI对细胞周期分布和细胞凋亡的影响.结果:PPI对CNE-2细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性,24和48h半数抑制量(50% concentration of inhibition,IC50)分别为6.68Wμg/mL和3.84μg/mL.1.5和3μg/mL PPI的放射增敏比分别为1.10和1.44,DDP阳性对照组放射增敏比为1.22.增敏组调亡率、G2/M期细胞比例较对照组增多(P<0.05).结论:PPI对鼻咽癌细胞系CNE-2具有放射增敏作用,其机制可能与促进细胞凋亡及引起G2/M期阻滞有关.
-
HPLC梯度洗脱法同时测定散结止痛膏中重楼皂苷 I、重楼皂苷Ⅱ、3，4-二羟基苯甲酸甲酯和对香豆酸的含量
目的：采用高效液相梯度洗脱法建立散结止痛膏中重楼皂苷I、重楼皂苷Ⅱ、3，4-二羟基苯甲酸甲酯和对香豆酸含量测定方法。方法：Hypersil C18色谱柱（4．6mm ×250mm，5μm）；体积流量：1．1ml/min；流动相A为乙腈，流动相B为0．05％磷酸溶液；检测波长λ1＝203nm（检测重楼皂苷I和重楼皂苷Ⅱ），检测波长λ2＝303 nm （检测3，4-二羟基苯甲酸甲酯和对香豆酸）。结果：重楼皂苷I、重楼皂苷Ⅱ、3，4-二羟基苯甲酸甲酯和对香豆酸分别在0．0736～1．4720μg （ r＝0．9999）、0．0314～0．6280μg （ r＝0.9996）、0．0114～0．2280μg（r＝0．9997）、0．0182～0．3640μg（r＝0．9993）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为98．48％、97．70％、96．87％、98．21％， RSD （ n ＝6）分别为0.82％、1．12％、1．24％、0．97％。结论：该方法简便、准确、灵敏、重复性好，可作为散结止痛膏的含量控制方法。
-
反相高效液相色谱法测定重楼分散片中重楼皂苷I的含量
目的 建立反相高效液相色谱法测定重楼分散片中重楼皂苷I含量方法,为控制重楼分散片的质量提供依据.方法 色谱柱为Waters Symmetry ShieldTMRP18柱,柱温为室温,流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm,以乙腈-水(41:59 )为流动相,室温操作.结果 该方法线性范围为2.112～21.112 μg,r=0.9999,平均回收率为99.8%(RSD=1.48%,n=6).结论 反相高效液相色谱法测定重楼分散片中重楼皂苷I含量简便、准确,结果稳定,重复性好.
-
重楼皂苷I对结肠癌耐奥沙利铂细胞株的毒性研究
目的 探讨重楼皂苷Ⅰ对结肠癌耐奥沙利铂细胞的体外毒性及其机制.方法 复苏结肠癌SW480、LoVo细胞,采用大剂量冲击法诱导结肠癌耐奥沙利铂细胞,CCK-8实验检测其耐药性,Transwell细胞侵袭实验检测其侵袭性以鉴定其恶性生物学行为.CCK-8实验检测重楼皂苷Ⅰ对耐药细胞及其亲代细胞的毒性作用,Annexin V/PI染色流式细胞术检测重楼皂苷Ⅰ处理细胞后Annexin V/PI阳性细胞比例以检测其对细胞凋亡的作用.提取细胞总蛋白,Western blotting检测重楼皂苷I处理细胞后细胞中凋亡相关蛋白Bax和Caspass-3等蛋白的表达.结果 大剂量奥沙利铂冲击法成功诱导奥沙利铂耐药细胞LoVo/L-OHP、SW480/L-OHP.CCK-8细胞毒性实验显示,LoVo/L-OHP、SW480/L-OHP的IC50值比其亲代细胞提高5~25倍,Transwell细胞侵袭实验证实,耐药细胞比亲代细胞具有更强的侵袭性(P<0.019).CCK-8实验显示,重楼皂苷I对SW480、LoVo及其耐奥沙利铂细胞的IC50值相似.Annexin V/PI染色、流式细胞仪检测凋亡细胞比例显示,重楼皂苷I处理细胞后,Annexin V/PI阳性细胞率明显升高,Western blotting结果显示,重楼皂苷Ⅰ处理细胞后细胞中Bax和Caspass-3蛋白表达水平升高.这两个实验证实,重楼皂苷Ⅰ能够促进结肠癌细胞及其耐药细胞凋亡.结论 重楼皂苷I对结肠癌细胞及耐奥沙利铂细胞均有良好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用是通过介导结肠癌细胞凋亡实现的.
-
热毒清胶囊质量标准研究
目的 研究并建立中药热毒清胶囊的质量标准.方法 采用薄层色谱(TLC)法对方中的重楼、南板蓝根和冰片进行了色谱鉴别,采用高效液相色谱(HPLC)法测定了重楼中重楼皂苷1(C51H82O20)的含量.结果 鉴别方法重复性好,专属性强.当进样量在0.079 2～0.792 0 mg范围内时,重楼皂苷I进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均回收率为98.49%,RSD=1.58%.结论 所研究的方法可有效地控制热毒清胶囊的质量.
-
反相高效液相色谱法测定宫血宁片重楼皂苷Ⅰ与重楼皂苷Ⅱ含量
目的 建立测定宫血宁片中重楼皂苷Ⅰ与重楼皂苷Ⅱ的高效液相色谱法.方法 供试品用乙醇超声处理(功率250 W,频率40 kHz)提取,滤过,用乙醇定容后,注入高效液相色谱仪.色谱条件:C18色谱柱,乙腈-水(42:58)为流动相,检测波长210 nm.结果 重楼皂苷Ⅰ与重楼皂苷Ⅱ在0.16～0.80 μg范围内线性关系良好,相关系数r为0.999 8.结果 该方法灵敏度高,结果准确、可靠,操作简便,适用于该产品中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量测定以及制剂质量控制.
-
重楼皂苷I对大鼠原代成骨细胞增殖的影响及机制研究
目的:研究重楼皂苷I(PPL I)对大鼠原代成骨细胞增殖的影响及其机制.方法:选择酶消化法分离大鼠原代成骨细胞并进行培养,加入含不同浓度PPL I(3、10、30、100μmol/L)的培养液,采用CCK-8试剂盒、EdU试剂盒、碱性磷酸酶活性试剂盒检测大鼠原代成骨细胞的增殖情况,采用免疫印迹法观察PPL I(3、10、30μmol/L)对大鼠成骨细胞中骨保护蛋白(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响.结果:PPL I可有效地促进大鼠原代成骨细胞的增殖,降低RA N K L的表达,升高O PG的表达,呈浓度依赖性.结论:PPL I可能通过影响O PG/RANKL通路,发挥促进大鼠原代成骨细胞增殖与分化的作用.
