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N2亚型文献资料
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双重荧光定量RT-PCR快速检测N1、N2亚型流感病毒的研究
目的 利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法.方法 根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性.结果 N1、N2亚型流感病毒的检测灵敏度为10拷贝/μl,扩增效率分别为10221％和10178％,标准曲线相关系数大于99％,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增.结论 双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N1、N2亚型流感病毒.
关键词： 流感病毒 N1亚型 N2亚型 荧光定量RT-PCR -
禽流感病毒H1、H3、H5、N2亚型多重RT-PCR检测方法的初步研究
目的 根据禽流感病毒H1、H3、H5亚型的HA基因和N2型NA基因的保守序列,设计出四对RT-PCR 引物,建立一步法多重RT-PCR对禽流感H1、H3、H5、N2四亚型进行快速检测.方法 利用所设计的四对引物,通过对该方法扩增条件的优化,成功建立快速检测禽流感病毒H1、H3、H5、N2四亚型的一步法多重RT-PCR.利用禽流感H1、H3、H5、N2四亚型毒株和其它相关标准毒株进行敏感性和特异性试验.结果 与结论所建立的一步法多重RT-PCR具有较高的特异性和敏感性,与禽流感其它亚型和NDV、IBV、ARV﹑IBDV的核酸均无交叉反应.用该方法检测现场样品395份(4省20多个地区),结果与经典检测方法一致.
