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钠钙交换体启动子文献资料
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钠钙交换体启动子促进诱导多能干细胞向心肌细胞转化
背景：诱导多能干细胞治疗缺血性心脏病被认为是极具前景的方法，但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的：探讨钠钙交换体(NCX1)启动子诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的作用。
方法：构建含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒，使用ViraPowerTM慢病毒包装系统共转染293FT细胞。收集病毒测定病毒滴度后感染小鼠诱导多能干细胞，并使用嘌呤霉素进行筛选。观察胚状体数量以及诱导多能干细胞的分化效率，使用RT-PCR、免疫荧光分析法检测心肌特异标记物。
结果与结论：成功构建了含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒，感染小鼠诱导多能干细胞后使用流式细胞仪分选NCX1+/GFP+细胞。与NCX1-/GFP-细胞相比，NCX1+/GFP+细胞在4 d即出现细胞分化和跳动，NCX1+细胞GATA4/MEF2c/Nkx2.5基因表达分别是NCX1-细胞的4.2，7.5，2.5倍，免疫荧光显示CX43和心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。结果表明，钠钙交换体1启动子可以促进小鼠诱导多能干细胞向心肌细胞分化。
