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C57BL/6胎鼠文献资料
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细胞质膜微囊蛋白1敲除小鼠神经干细胞培养与生物学特性
背景：研究发现细胞质膜微囊蛋白1在哺乳动物脑内表达，参与脑的正常发育，能影响脑内神经干细胞的增殖。目的：从细胞质膜微囊蛋白1敲除小鼠脑内获取神经干细胞并观察其生物学特性。方法：分别取E14-E16正常C57BL/6胚胎小鼠和细胞质膜微囊蛋白1敲除C57BL/6胚胎小鼠全脑，采用酶消化法获得单细胞悬液，置神经干细胞条件培养基中培养，原代培养7 d后，加入含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基诱导7 d。结果与结论：从两种胎鼠脑内获取的细胞悬液培养1d后较多细胞发生死亡，可见单个细胞漂浮于培基中，透光度较好，3 d后逐渐形成悬浮生长的多细胞团。传代后培养板底部可见少量细胞发生贴壁，7 d后可见大量细胞团出现，且细胞质膜微囊蛋白1敲除胎鼠源细胞增殖速度更明显。免疫细胞化学检测显示，两种胎鼠来源细胞团均为巢蛋白阳性，分化细胞可见神经丝蛋白200、胶质纤维酸性蛋白或O4阳性表达；正常C57BL/6胎鼠来源细胞团呈细胞质膜微囊蛋白1阳性表达，而细胞质膜微囊蛋白1敲除C57BL/6胎鼠来源细胞团呈细胞质膜微囊蛋白1表达阴性，且神经干细胞成球速度和成球数量优于正常胎鼠神经干细胞。说明实验成功从细胞质膜微囊蛋白1敲除胎鼠脑内培养出细胞质膜微囊蛋白1缺失神经干细胞，细胞质膜微囊蛋白1可促进神经干细胞的增殖，并抑制其分化。
