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酶消法文献资料
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小鼠乳鼠原代心肌细胞的改良培养
背景：大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟，但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得，而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处，具有更高的研究价值。
目的：改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法，得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。
方法：将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞，实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开，先用胰酶消化心肌组织，使心肌组织变得松散，再用胶原蛋白酶，作用于细胞间质的胶原纤维，使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间，严格控制试剂pH值和各步骤的温度。
结果与结论：心肌细胞在接种24 h后开始贴壁，48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动，72 h后彼此形成交联，96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇，并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95%以上。结果证实，实验采用改良方法成功培养出小鼠乳鼠心肌细胞，并且保留心肌细胞的结构和功能，纯度和成活率高，是可行的培养方法。
