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人端粒酶反转录酶基因转染人胚胎大脑皮质神经元的凋亡
背景：人端粒酶反转录酶重组腺病毒转染原代培养的人胚胎大脑皮质神经元，可以促进细胞生存，抑制凋亡。
目的：观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein，Aβ)诱导人胚胎大脑皮质神经元凋亡的影响。
方法：人胚胎大脑皮质神经元原代培养后，分为3组：对照组、Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组。Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组细胞在培养144 h后，用Aβ25-355μmol/L干预24 h。人端粒酶反转录酶组在Aβ25-355μmol/L干预72 h进行人端粒酶反转录酶基因转染。
结果与结论：原代培养的人胚胎大脑皮质神经元培养7d后，出现凋亡细胞，而Aβ25-35干预后使凋亡细胞数量增加，而人端粒酶反转录酶可防止Aβ25-35诱导的人胚胎大脑皮质神经元的凋亡。 -
hTERT基因转染对人神经元活力的影响
目的：观察人端粒酶逆转录酶（ human telomerase reverse transcriptase，hTERT）对Aβ诱导的人胚胎大脑皮质神经元细胞活力的影响。方法：人胚胎大脑皮质神经元原代培养后，以 hTERT重组腺病毒转染神经元，用Aβ25-35诱导神经元的凋亡，72 h后用MTT检测各组细胞数量和活力，并计算其保护率。结果：hTERT重组腺病毒转染后72 h进行Aβ干预，此时hTERT对神经元的保护力为29.8％，活细胞的数量及细胞活力（0.310±0.033）明显高于非转染组（0.237±0.081），P＝0.002，差异有统计学意义。结论：Aβ干预后的神经元，其活力明显下降，而hTERT重组腺病毒转染可以促进神经元存活，对Aβ干预的人胚胎大脑皮质神经元具有保护作用。
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hTERT对干预后人胚胎神经元 cdk5 P-CREB表达影响的初步观察
目的：对干预后人胚胎神经元周期素依赖性蛋白激酶5（cyclin-dependent kinase 5，cdk5）、cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein，P-CREB）表达影响。方法人胚胎大脑皮质神经元原代培养后，用 hTERT重组腺病毒转染神经元，用 Aβ25-35干预转染后神经元。实验分为转染组和非转染组。Western-blot检测 cdk5、p-CREB的变化。结果 Aβ25-35干预后，神经元内 cdk5表达量明显增加，而 hTERT基因转染组 cdk5增加的低于非转染组。干预后神经元内 p-CREB表达量明显降低，而 hTERT基因转染组，p-CREB表达量高于非转染组。结论 Aβ25-35干预人胚胎大脑皮质神经元，可以导致 cdk5的异常活化，p-CREB的降低；hTERT基因转染可有效抑制 cdk5的异常激活，防止 p-CREB的降低。
