首页 > 文献资料
-
周期性牵张椎间盘纤维环细胞肌动蛋白骨架的重排
背景：当椎间盘承受应力时，髓核内部产生的液压使纤维环向外扩张、膨胀，纤维环胶原纤维被拉伸，使纤维环细胞外基质也受到压力的作用。蛋白聚糖是椎间盘中主要的蛋白多糖成分，基质金属蛋白酶2是椎间盘降解细胞外基质的主要酶，金属蛋白酶组织抑制剂是特异性抑制基质金属蛋白酶活性的多功能因子，与基质金属蛋白酶相互调节，保持平衡。
目的：探讨周期性牵张在椎间盘纤维环基质代谢中的作用机制。
方法：采用Flexcell4000牵张系统对体外培养的大鼠椎间盘纤维环细胞施加牵张应变为2%和10%、频率为1.0 Hz，时间为2 h和12 h的周期性牵张，分别于2 h和12 h卸载并收集细胞和条件培养基分别进行基因和蛋白检测。采用荧光定量PCR检测aggrecan、基质金属蛋白酶2以及组织基质金属蛋白酶抑制剂2 mRNA的表达；采用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2蛋白活性。
结果与结论：①2%牵拉对肌动蛋白骨架形成的应力纤维影响不大，10%牵拉则使肌动蛋白骨架发生明显解聚。②2%牵拉12 h Aggrecan上调，牵拉2 h基质金属蛋白酶2、组织基质金属蛋白酶抑制剂2上调，二者保持动态平衡，基质金属蛋白酶2活性无显著变化。③10%牵拉对Aggrecan无影响。无论牵拉2 h或12 h，均使基质金属蛋白酶2上调，组织基质金属蛋白酶抑制剂2下调，二者失衡，基质金属蛋白酶2活性无显著变化。④结果提示周期性牵张可以在基因水平上对纤维环细胞Aggrecan、基质金属蛋白酶2和组织基质金属蛋白酶抑制剂2基因进行调节，通过调节肌动蛋白骨架从而对力学刺激产生响应。 -
周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达的分子机制研究
目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞聚蛋白多糖(Aggrecan) mRNA中的相关机制.方法 采用自制周期性张应变加载装置对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞施以幅度为10％、频率为1 Hz的张应变刺激.采用Western blot技术检测周期性张应变作用不同时间后对椎间盘纤维环细胞ERK1/2信号分子磷酸化水平的影响,并观察其特异性阻断剂PD98059及siRNA-ERK2对周期性张应变下调椎问盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达的影响.结果 周期性张应变可上调纤维环细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平,具有双向、快速特点；阻断剂PD98059以及siRNA-ERK2均可部分逆转周期性张应变对纤维环细胞Aggrecan mRNA的下调作用.结论 周期性张应变可激活椎间盘纤维环细胞ERK1/2信号分子,并通过该信号分子下调椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达.
-
电针对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的影响
目的 观察电针“大椎穴”对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞Wnt1蛋白、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响,并初步探讨电针对颈椎间盘退变调控及抑制纤维环细胞凋亡的机制.方法 选用SPF级SD大鼠40只,随机分成空白组、模型组、电针组、美洛昔康组,采用Western blot法检测颈椎间盘的纤维环细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的表达水平的改变.结果 模型组与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05);电针组、美洛昔康组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).电针可增加颈椎间盘纤维环细胞的阳性表达,显著上调Wnt1、GSK-3β蛋白表达的水平.结论 电针“大椎穴”可能是通过调节经典的Wnt/β-catenin信号通路中关键因子Wnt1蛋白、GSK-3β蛋白的表达来抑制颈椎病模型大鼠的椎间盘纤维环细胞凋亡.
关键词： 颈椎病 电针 椎间盘纤维环细胞 Wnt1蛋白 糖原合成酶激酶-3β
