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何首乌丸加味干预后衰老模型大鼠睾丸生精细胞p53基因表达的变化
目的:观察中药何首乌丸加味对衰老模型大鼠睾丸生精细胞凋亡、血清睾酮含量和抗氧化能力的影响.方法:实验于2004-04/07在承德医学院基础医学研究所完成.①选用40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、何首乌丸加味组和阴性对照组,每组均为10只.模型组、何首乌丸加味组和阴性对照组均采用D-半乳糖200 mg/(kg·d)连续腹腔注射40 d制作亚急性衰老大鼠模型.模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理;何首乌丸加味用药组大鼠于造模成功后用何首乌丸加味(由何首乌15 g,怀牛膝15 g,肉苁蓉10 g,淫羊藿10 g,丹参25 g,茯苓15 g组成,每副含生药90 g,按传统方法加水煎成溶液)8.1 g/kg灌胃给药,1次/d,共30 d;阴性对照组大鼠于造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同何首乌丸加味用药组.正常组大鼠自由摄食、饮水,未加任何干预措施.②所有大鼠经内眦取血2 mL,采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清睾酮含量、黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶的活性;大鼠处死后取睾丸组织、常规石蜡包埋,SP免疫组化法检测睾丸生精细胞p53基因的表达.结果:大鼠40只全部进入结果分析.①血清睾酮含量:模型组明显低于正常组,分别为(0.52±0.14),(1.26±0.32)μg/L(t=3.004,P<0.05);何首乌丸加味组为(1.16±0.32)μg/L,高于模型组(t=2.321,P<0.05).②血清超氧化物歧化酶活性:模型组明显低于正常组,分别为(106.22±9.63),(148.73±12.93)kNU/L(t=13.339,P<0.01);何首乌丸加味组为(140.05±15.57)kNU/L,高于模型组(t=9.970,P<0.01).③p53阳性细胞率:模型组明显高于正常组,分别为(59.13±10.53)%和(36.99±9.45)%,(χ2=9.696,P<0.01);何首乌丸加味组为(43.03±12.65)%,低于模型组(χ2=5.122,P<0.05).结论:何首乌丸加味可通过提高睾酮含量、增强抗氧化能力、降低生精细胞的凋亡改善衰老大鼠睾丸的功能,起到延缓衰老的作用.
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补肾中药对肾脏1α羟化酶作用的探讨
探讨肾主骨理论与肾脏1α羟化酶关系.6月龄健康雄性SD大鼠40只,随机均分为对照组、模型组、中药组、西药组4组.肾脏局部辐射制备骨质疏松症模型,照射后1周开始用药,中药组灌胃给予中药(菟丝子、何首乌等提取的活性部位)1.34g*kg-1*d-1,西药组给予萌格旺0.1μg*kg-1*d-1,其他两组以等容量0.5%CMC替代.3个月后,分别测定各组大鼠腰椎、股骨骨密度、骨生物力学指标以及肾脏羟化酶活性.结果:与对照组比较,模型组骨密度、骨生物力学指标以及羟化酶活性均降低;与模型组比较,中药组骨密度、骨生物力学指标以及羟化酶活性均显著改善.提示补肾中药能提高放射损伤大鼠肾脏1α羟化酶的活性,这可能是"肾主骨"理论的重要生理学基础之一.
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何首乌抗衰老机制研究
何首乌又名地精、马肝石,为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的块根,始载于<开宝本草>,味苦、甘、涩,性微温,无毒,归肝、肾经,功能补阴养血,润畅通便,截疟,解毒.现代研究表明,何首乌主要含有蒽醌、二苯乙烯苷、磷脂等成分,具有降血脂,延缓动脉粥样硬化、抗衰老、提高免疫力、益智等作用.
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何首乌蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响
[目的]观察何首乌蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆与相关酶及代谢产物的影响.[方法]选用昆明种小鼠80只,随机分为8组:正常组,模型组,维生素E(VE)组(剂量为90 mg·kg-1·d-1),何首乌蛋白质(PRPM)高、低剂量组(剂量分别为20、5 mg·kg-1·d-1),何首乌蒽醌苷(AGRPM)高、低剂量组(剂量分别为28、7 mg·kg-1·d-1),AGRPM与PRPM混合组 (混合组,均取两者低剂量);除正常组外,其他组均采用长期(7周)皮下注射D-半乳糖复制衰老小鼠模型.采用三等分辐射式迷宫测试小鼠的学习速率,用一次性被动回避反应测试小鼠的记忆能力;采用紫外可见分光光度计测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶(MAO)的活力及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量;采用荧光分光光度计测定肝组织中脂褐素(LF)的含量.[结果]高剂量PRPM组能显著改善衰老小鼠的记忆能力(P<0.05),高剂量AGRPM组可显著改善衰老小鼠的学习速率和记忆能力(P<0.05或P<0.01):PRPM组和AGRPM组均能显著增加衰老小鼠的肝系数、胸腺系数、脑系数和脾系数(P<0.05或P<0.01),降低衰老小鼠脑组织MAO的活力、脂质过氧化产物MDA的含量及肝组织中LF的含量(均P<0.05或P<0.01);PRPM、AGRPM低剂量组及混合组均能显著增加衰老小鼠脑组织SOD的活力(P<0.05或P<0.01).[结论] 何首乌蛋白质和蒽醌苷具有一定的抗衰老及促进记忆能力的作用.
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何首乌、制何首乌与茯苓配伍对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响
目的:研究何首乌、制何首乌以及分别配伍不同剂量茯苓对大鼠肝脏微粒体细胞色素P450酶(CYP450)的影响.方法:将大鼠分为7组,每日灌胃主药30g·kg-1,连续给药90d,测定大鼠CYP450的含量.结果:给药组与对照组比较,何首乌A组、何首乌B量组对大鼠肝微粒体CYP450有显著性升高作用(P<0.05);何首乌C组对其有升高作用,但不具统计学意义.制何首乌A、B、C各组对大鼠肝微粒体CYP450均无显著性影响.结论:何首乌、何首乌配伍大剂量茯苓能够增加大鼠肝微粒体CYP450含量,制何首乌各给药组对其影响不显著.
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何首乌不同成分与肝细胞凋亡的相关性研究
目的:研究何首乌不同成分对大鼠肝脏细胞凋亡的影响.方法:将何首乌中不同成分提取物大黄素、大黄酸、大黄酚,以及制首乌分别按不同剂量给予大鼠每天灌胃一次,连续3个月,检测大鼠肝脏细胞凋亡情况,用AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒给予凋亡细胞染色,利用荧光显微镜检测细胞凋亡的发生.结果:大鼠肝脏细胞凋亡的测定结果制首乌组及大黄酚组与空白对照组比较有显著差异(P<0.05).
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制何首乌不同剂量与大鼠肝损伤程度的实验研究
目的:观察陕西安康出产的野生制何首乌不同剂量对大鼠肝损伤的程度.方法:本实验给药组剂量依次为4g/kg,9.6g/kg,22g/kg,40g/kg(分别相当于成人每日临床用量的20、50、100、200倍),每日灌胃大鼠一次,连续4个月(前3个月为给药期,第4个月停药恢复期),主要进行大鼠肝脏组织病理学检测.结果:3个月末肝脏组织病理切片显示光镜下大剂量及较大剂量给药组可见散在炎细胞浸润,肝血窦充血,枯否氏细胞增生活跃并可见吞噬色素颗粒;透射电镜下大剂量给药组可见部分肝细胞核内染色质凝集或边集于核膜下,线粒体轻度肿胀,个别标本可见毛细胆管结构不清晰,Kupffer细胞增多.恢复期后肝脏病理切片镜下观各给药组均未见明显病理性改变.结论:制何首乌大剂量长期灌胃对大鼠可导致肝脏炎症损伤,停药后可恢复正常.
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制何首乌致肝损害的实验研究
目的:观察制何首乌对大鼠的长期毒性作用.方法:每天按不同剂量40,20,10g/kg(分别相当于成人每日临床用量的100、50、25倍)灌服大鼠1次,连续14周(6周时处死1/3动物,12周时1/3动物停药进行恢复,1/3继续给药2周),检测大鼠血液生化学指标及凝血时间,称量脏器重量并计算大鼠脏器指数.结果:与对照组相比,给药组对大鼠肝脏转氨酶AST,ALT,ALP在不同阶段有一定的影响(P<0.05),TBIL、CHO等其他各项生化指标检测结果给药组与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);凝血时间对照组与给药组比无显著性差异;个别脏器的脏器指数与对照组比有所变化(P<0.05).结论:制何首乌对大鼠肝脏有一定的毒副作用,但属可逆性损伤.