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  • 拟态弧菌重组蛋白OmpUa的表达条件优化及其抗原性分析

    作者:李世东;岑峻宇;李槿年;王莉

    目的 分析重组蛋白OmpUa的表达形式和抗原性,优化拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌( pMALc4X-OmpUa/TB1)的表达条件.方法 诱导基因重组工程菌表达,分别采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白OmpUa的表达形式及其抗原性.采用正交试验设计L9(34)方案,通过SDS-PAGE和电泳图谱光密度扫描分析培养基种类、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度等因素对重组蛋白表达的影响.结果 重组蛋白OmpUa主要以可溶性形式表达,具有良好的抗原性.基因工程重组菌接种LB培养基,37℃振荡培养3h时加入0.5 mmol/LIPTG诱导4h,即可获得高表达量的重组OmpUa蛋白.结论 摸索出拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌的佳表达条件,为下一步大量制备OmpUa诊断性抗原奠定了基础.

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