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栽体两性电解质文献资料
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大鼠心肌蛋白双向凝胶电泳技术的建立
[目的]建立大鼠能源心肌蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术.[方法]提取SD大鼠心肌总蛋白,以载体两性电解质pH梯度等电聚焦为第一向电泳,垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向电泳,完成2-DE,考马斯亮蓝染色后扫描获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析.对2-DE中关键环节,如调节pH 3～10和pH 4～6栽体两性电解质的比例、样品离心处理、增加等电聚焦电压和离子强度等方面进行优化.[结果]通过样品处理后离心除去多糖成分,pH 3～10和pH 4～6载体两性电解质的比例调至1:2,改变电泳条件,成功消除横向拖尾、分辨率较高的心肌蛋白双向电泳图谱.每张图谱可检测到超过150个蛋白质点,匹配率大于55%.[结论]建立了SD大鼠心肌蛋白的双向凝胶电泳分析技术,该方法可行、重复性好,所提供的方案具有一定参考意义.
