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毒热平注射液体外抗甲型流感病毒的作用研究
目的:观察毒热平注射液体外抗流感病毒的作用.方法:采用结晶紫粢色法测定毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其作用24、36、48、72h的抗病毒效率.结果:毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在高浓度(≥0.18mg/mL)时有直接杀病毒作用.抗病毒效率在48h达高峰,且随时间延长在高浓度(≥0.27mg/mL)时基本不变,而在低浓度时有下降趋势.结论:毒热平注射液具有明显的体外抗流感病毒作用.
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毒热平注射液抗流感病毒作用的体内实验研究
目的:观察毒热平注射液对流感病毒感染小鼠的死亡保护作用和对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用.方法:用流感病毒鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,观察肺指数、病毒致小鼠病死率.结果:毒热平注射液的大、中剂量组对小鼠流感病毒性肺炎有抑制作用,对流感病毒感染小鼠具明显的死亡保护作用.结论:毒热平注射液在小鼠体内具有效的抗流感病毒作用.
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毒热平注射液对流感病毒感染的巨噬细胞分泌NO的影响
目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞分泌NO的影响.方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用6个不同浓度的含药维持液继续培养,分别于6、12、24和36小时收集细胞上清液,用Griess试剂法检测其释放NO的水平.同时提取1 μg/ml药物组作用24小时后的细胞mRNA和核蛋白,利用Real Time PCR法和Western blot技术,检测毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞NF-κB p65 mRNA及其蛋白表达水平的影响.结果:在药物作用的不同时间,60、30和10 μg/ml各剂量组均能显著下调病毒感染巨噬细胞NO的分泌水平,且具有剂量依赖性;该药可明显下调病毒感染巨噬细胞NF-κB p65 mRNA及其蛋白表达水平.结论:毒热平可通过下调细胞核因子-κB活性,抑制病毒感染巨噬细胞NO的分泌,发挥抗病毒感染作用.
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毒热平注射液对病毒感染巨噬细胞IRAK4表达的影响
目的 研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1 表达IRAK4(IL-1 receptor associated kinase 4, IRAK4)的影响.方法 用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10 μg/ml浓度含药维持液继续培养,于12 h弃细胞上清液并收集细胞,提取细胞RNA和核蛋白,进行实时定量PCR反应(RT-PCR)和Western-blot实验,分别测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平的影响.结果 毒热平注射液可下调病毒感染巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平.结论 毒热平注射液的抗病毒作用可能与下调依赖MyD88的信号传导通路中IRAK4的表达有关.
