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芩荑合剂对哮喘大鼠STAT6表达的影响
目的:观察芩荑合剂对哮喘大鼠肺组织模型信号转导子和转录激活子(STAT6)蛋白含量及其mRNA表达影响,探讨芩荑合剂对支气管哮喘的作用机理.方法:用卵清蛋白建立大鼠哮喘模型,将48只SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、芩荑合剂低剂量组、芩荑合剂中剂量组、芩荑合剂高剂量组,其中正常对照组、哮喘模型组给予生理盐水灌胃,芩荑合剂高、中、低剂量分别按生药量5.4、2.70、1.35 g/(kg· d)灌胃,地塞米松按1.4 mg/(kg·d)灌胃,采集肺组织标本,分别采用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法和免疫组化法检测哮喘大鼠模型STAT6m RNA及其蛋白表达.结果:中、高剂量组STAT6 mRNA及蛋白表达较哮喘组显著减弱,有显著差异(P＜0.01),与地塞米松组比较无统计学意义.结论:芩荑合剂通过降低哮喘大鼠STAT6蛋白含量以及减弱STAT6 mRNA在气道上皮细胞的表达,来干预气道炎症,从而达到治疗支气管哮喘的目的.
关键词： 芩荑合剂 哮喘大鼠 STAT6蛋白 STAT6 mRNA -
辐射引起人结肠癌细胞系HT-29中STAT6蛋白活化
目的:研究电离辐射能否导致人结肠癌细胞系HT-29中信号转导子与转录活化子6(STAT6)蛋白活化,从而探讨肿瘤出现放射抗拒的可能机制.方法:用流式细胞仪检测HT-29细胞接受2 Gy射线照射后30 min、1 h、2 h细胞内STAT6蛋白的活化情况.结果:HT-29细胞接受射线照射后出现STAT6的活化,在照射后1 h达高峰(P＜0.01),2 h后稍高于照射前水平(P＜0.05).结论:射线可以引起HT-29细胞中STAT6蛋白的活化,从而导致细胞出现放射后的凋亡抑制,可能部分解释肿瘤细胞的放射抗拒性.
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RNA干扰抑制STAT6基因表达的初步研究
目的:构建针对信号转导子和转录激活子6(Singnal transducers and activators of transcription 6,STAT6)基因的干扰质粒,并观察其对STAT6蛋白表达的抑制效果.方法:将构建的短发夹干扰质粒(Short hairpin RNA,shRNA)表达载体,与合成的pIRES2-EGFP-STAT6基因表达质粒共同转染COS7细胞,荧光显微镜下观察干扰效果,并利用Western blot观察蛋白表达的变化.结果:将pIRES2-EGFP-STAT6重组载体转染COS7细胞后,结果显示STAT6蛋白可以在细胞中高水平表达;与阴性对照组相比,STAT6 shRNA-1干扰组和STAT6 shRNA-2干扰组STAT6蛋白表达水平分别是23.1%和9.6%.结论:成功构建并筛选到具有显著干扰效率的STAT6干扰质粒,为哮喘的基因治疗研究奠定了基础.
