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昆明山海棠碱对胃癌SGC-7901细胞增殖和侵袭能力的抑制作用及机制
目的 探讨昆明山海棠碱对胃癌SGC-7901细胞体外增殖和侵袭能力的影响及机制.方法 胃癌SGC-7901细胞经昆明山海棠碱处理后,通过MTS法检测细胞增殖和黏附能力的变化,通过细胞划痕试验检测细胞迁移运动能力的变化,通过Transwell侵袭试验检测细胞侵袭能力的变化,通过流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡和周期的变化,通过免疫印迹(Western blot)和realtime PCR试检测bcl-2、Survivin、cyclin D1、cyclin E、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、CD44以及β-catenin表达的变化,通过报告基因技术考察转录因子Twist活性的变化.结果 MTS试验结果显示昆明山海棠碱可抑制SGC-7901细胞的体外增殖、黏附、迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期在G0/G1期,bcl-2、Survivin、cyclin D1、cyclin E、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、CD44和β-catenin表达显著下降,而TIMP-1表达上调,同时Twist转录活性也明显下降.结论 昆明山海棠碱可显著抑制胃癌SGC-7901细胞细胞体外增殖、黏附、迁移和侵袭,其机制可能与抑制β-catenin/Twist信号途径,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期有关.
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昆明山海棠碱诱导白血病细胞株凋亡的分子机制
目前在世界范围内,新药的寻找已逐渐转向天然动植物,在这一过程中,我国传统的中医中药已越来越受到人们的青睐.昆明山海棠[Tripterygium Hypoglaucum (Levl) Hutch,简称THH]是我国的传统中药,属卫矛科雷公藤属,但毒性远比雷公藤小.临床上主要用来治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮、肿瘤,并具有镇痛、抗炎、抗雄性生育和致突变作用[1].1999年我室首次报道THH水提取液具有诱导肿瘤细胞凋亡的效应后[2],又分离了其主要活性成分--昆明山海棠生物碱(THH碱),近期又对其诱导Jurkat淋巴瘤细胞株和HL-60急性骨髓白血病细胞株凋亡的分子机制进行了系统研究,现综合报告如下.
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THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡
目的探讨昆明山海棠碱在凋亡中对细胞内游离钙离子浓度的影响.方法 THH碱诱导Jurkat 细胞后,采用Indo-1 AM及PI进行细胞染色、流式细胞术等手段在单细胞水平上检测细胞内钙离子浓度的变化.结果 THH碱诱导后细胞内钙离子浓度未见明显变化.结论 THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat细胞凋亡.