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N-硬脂酰丝氨酸基于PI3K和AMPK信号通路抑制葡萄糖摄取下降
目的 探讨N-硬脂酰丝氨酸(N-stearoyl serine,NSS)能否抑制低氧引起的PC12细胞中葡萄糖摄取下降.方法 采用PC12细胞,建立低氧损伤实验模型;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MIT)观察PC12细胞活力,通过2-[氮-7-硝基苯-2-乙二酸,3,4-羟氨基)]-2-脱氧葡萄糖[2-[N-(7-nitro benze-2-oxa-1,3 diazol-4-yl),2-NBDG]摄取率测定葡萄糖摄取过程,通过Western blotting法测定细胞中葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)和4(glucose transporter 4,GLUT4)的蛋白表达,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(phosphorylated Protein Kinase B,p-Akt)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)的蛋白表达.结果 在低氧环境中PC12细胞活力降低,葡萄糖摄取持续性下降,细胞膜上GLUT1、GLUT4、PI3K、p-Akt及p-AMPK蛋白表达明显降低;NSS(N-stearoyl serine,NSS)(0.1 ~5μmol·L-1)剂量依赖性增加PC12细胞活力,逆转了低氧引起的PC12葡萄糖摄取下降,并上调细胞膜上GLUT1和GLUT4以及细胞中总的PI3K、p-Akt及p-AMPK蛋白表达,AMPK抑制剂Compound C均能抑制上述现象,而PI3K抑制剂除了GLUT1蛋白均能抑制.结论 NSS通过AMPK及PI3K信号转导通路调控低氧引起的PC12细胞中葡萄糖摄取障碍,其中GLUT1转位并不依赖于PI3K途径.