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RalB蛋白文献资料
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RalB在多种肿瘤细胞中的表达及意义
目的 探讨RalB(v-ral simian leukemia viral oncogene homolog B, ras related; GTP binding protein)蛋白在多种肿瘤细胞中的表达及意义.方法 以人胚肾293T细胞为正常细胞对照,选用8种不同组织的肿瘤细胞,采用抗RalB的单克隆抗体通过Western blot方法检测其RalB蛋白的表达.结果 RalB在293T细胞中表达明显降低,在乳腺癌细胞株MCF-7、卵巢癌细胞株HO8910、宫颈癌细胞株Hela、肺癌细胞株、结肠癌细胞株LOVO、SW480中均有表达,其中RalB蛋白在结肠癌细胞株SW480中表达明显增高.结论 RalB可能以组织特异性的方式在不同肿瘤细胞中表达.
关键词： RalB蛋白 肿瘤细胞 Western blot方法 -
抗RalB单克隆抗体的制备及初步应用
目的 制备抗Ras相关蛋白RalB的单克隆抗体(McAb),探讨RalB蛋白在哺乳动物真核细胞中的表达,为进一步研究RalB功能奠定基础.方法 以纯化的原核表达RalB蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗RalB蛋白的McAb的杂交瘤细胞株.通过免疫组织化学方法和Western-blot方法分别对RalB在组织中的表达及特异性进行鉴定.结果 获得2株能高效分泌特异性McAb的抗RalB的杂交瘤细胞系F001,F002,其免疫球蛋白亚类均为IgG1.免疫组织化学实验结果表明RalB定位于肝癌细胞的细胞膜,Western-blot显示RalB在不同的肝癌细胞及正常肝细胞中均有表达.结论 成功获得抗RalB的特异性的单克隆抗体,为进一步研究RalB与肿瘤的相关功能研究创造了条件.
