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β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞VEGF及VEGFR-2表达的影响
目的 观察β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)血管内皮生长因子(VEGF)及其受体mRNA表达的影响,进一步探讨β-榄香烯在抑制肿瘤血管形成过程中的作用.方法 原代培养大鼠EPCs.胃腺癌细胞株SGC-7901培养上清液诱导EPCs 12 h后,分别用0、5、10、20 μg/mL β-榄香烯干预48 h,用20 μg/mL β-榄香烯干预0、12、24、48 h.采用RT-PCR法检测各组EPCs VEGF和VEGFR-2的mRNA表达水平.结果 随着β-榄香烯浓度及作用时间的增加,EPCsVEGFR-2的表达明显下降;当β-榄香烯浓度增加至10 μg/mL及作用时间延长至24 h,EPCs VEGF的表达水平较对照组明显降低(P＜0.05).结论 β-榄香烯可降低EPCs VEGF及VEGFR-2 mRNA的表达水平,从而减少EPCs的动员,进一步抑制EPCs参与肿瘤血管的形成.
关键词： 内皮祖细胞 肿瘤细胞上清液 β-榄香烯 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体2 -
β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞增殖与凋亡的影响
目的 观察β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)增殖与凋亡的影响,探讨β-榄香烯对EPCs参与肿瘤血管形成过程的作用.方法 原代培养大鼠骨髓来源EPCs经胃腺癌细胞株SGC-7901培养上清液诱导EPCs 12 h后,分为浓度效应组(β-榄香烯0、5、10、20 mg·L-1干预48 h)和时间效应组(20 mg·L-1β-榄香烯干预0、12、24、48 h).检测各组EPCs的增殖和凋亡率.结果 随着β-榄香烯剂量的增加和作用时间的延长,EPCs的增殖显著下降(P＜0.05),当β-榄香烯浓度为5 mg· L-1及作用时间为12 h时,EPCs凋亡率变化不明显,当β-榄香烯浓度增加至10 mg · L-1及作用时间延长为24 h时,EPCs凋亡率显著上升(P＜0.05).结论 β-榄香烯通过诱导EPCs的凋亡抑制其增殖,并可削弱EPCs在肿瘤血管发生中的作用.
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不同浓度肿瘤细胞上清液对成纤维细胞生长及表型转化的影响
目的 利用含不同浓度肿瘤细胞上清液的条件培养液培养成纤维细胞,观察其对成纤维细胞的生长及表型变化的影响.方法 用MTT法和流式细胞凋亡术测定成纤维细胞的生长变化与凋亡率.用RT-PCR检测成纤维细胞转化为肌成纤维细胞后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.用Western blot检测α-SMA、TGF-β1蛋白的表达.结果 MTT法发现肿瘤细胞上清液与2×DMEM∶F12比例为1∶1时,对成纤维细胞的生长有明显的促进作用,其生长速度快于其他浓度(P＜0.05).流式细胞凋亡术检测表明随着肿瘤细胞上清液浓度的提高,成纤维细胞的凋亡率也上升,1∶1的凋亡率与1.5∶1时有差异(P＜0.05).RT-PCR、Western blot表明普通培养液培养的成纤维细胞α-SMA与TGF-β1的表达高峰在第5天,第7天下降明显(P＜0.05).当比例为1∶1时,α-SMA与TGF-β1的表达增加,高峰提前到第3天(P＜0.05),第3天以后α-SMA的表达稳定(P=0.96,P=0.21).结论 当肿瘤细胞上清液与2×DMEM:F12比例为1∶1时,能有效促进成纤维细胞的生长,并促使成纤维细胞向肌成纤维细胞稳定的转化.
