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多囊卵巢综合征妊娠大鼠种植窗期子宫内膜HOXA1O表达及药物干预作用
目的 观察泰山磐石散、地屈孕酮对多囊卵巢综合征(PCOS)促排治疗妊娠大鼠种植窗期子宫内膜同源框基因A10(HOXA10)的影响.方法 对23日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)+大豆油溶液制作PCOS大鼠模型,对照组同期皮下注射大豆油.自80日龄起,对照组大鼠生理盐水灌胃、PCOS大鼠枸橼酸氯米芬(CC)灌胃后与雄鼠合笼,选取妊娠大鼠分为4组:对照妊娠组(A组)、PCOS促排妊娠组(B)、PCOS促排妊娠+泰山磐石散组(C)、PCOS促排妊娠+地屈孕酮组(D).各组均由妊娠第1天开始干预,其中A、B组以生理盐水灌胃,C组以泰山磐石散灌胃,D组地屈孕酮灌胃,直至处死前.于妊娠第5天,各组随机选取6只大鼠断头处死,留取子宫和子宫内膜标本.以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测各组大鼠子宫内膜HOXA10mRNA及蛋白表达.结果 A组子宫内膜HOXA10 mRNA及蛋白表达明显高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组子宫内膜HOXA10蛋白表达明显高于C、D组,差异有统计学意义(P＜0.05);C、D组HOXA10蛋白表达明显高于B组,有统计学差异(P＜0.05);C、D组间HOXA10mRNA及蛋白表达均无统计学意义(P＞0.05).结论 PCOS大鼠促排治疗后种植窗期子宫内膜HOXA10表达明显下调,泰山磐石散、地屈孕酮均能上调子宫内膜HOXA10的表达,改善内膜容受不良,这可能是中西药提高临床妊娠率、减少早期妊娠丢失的原因之一.
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泰山磐石散对 PCOS 促排卵大鼠早期妊娠丢失的干预作用
目的：探讨多囊卵巢综合征(PCOS)促排卵大鼠发生早期妊娠丢失的可能机制及泰山磐石散对妊娠丢失的干预作用。方法将正常大鼠与雄鼠合笼,选取妊娠大鼠作为 A 组。将脱氢表雄酮(DHEA)诱导 PCOS 模型大鼠经克罗米芬(CC)促排卵后与雄鼠合笼,建立 PCOS 促排卵妊娠大鼠模型,并随机分为：PCOS 促排妊娠+生理盐水组(B 组),PCOS 促排妊娠+泰山磐石散组(C 组)。B 组按照妊娠 d3、d4、d5,分别设为 B3组、B4组、B5组。以 RT-PCR、Western blot 分别检测各组妊娠大鼠子宫内膜同源框蛋白(HOXA10)、整合素ανβ3、同源结构域基因(EMX2)、白血病抑制因子(LIF)的 mRNA 及蛋白的表达。结果在 PCOS 促排妊娠 B 组中：B4组 HOXA10 mRNA 表达明显高于 B5组、B3组,差异有显著性(P <0.05~0.01),整合素ανβ3 mRNA 表达明显高于 B5组、B3组,有显著性差异(P <0.01),而 EMX2-mRNA 表达明显低于 B5组,差异有显著性(P <0.05)；B3组 LIF mRNA 的表达高,与 B4组组间差异显著(P <0.05)。在种植窗期：B5组 HOXA10、整合素ανβ3、LIF 的mRNA 表达均明显低于 A 组、C 组,差异有显著性(P <0.05~0.01)；A 组 EMX2的 mRNA 表达明显低于 B5组、C 组,差异有显著性(P <0.01)；B5组 HOXA10、整合素ανβ3、LIF 的蛋白表达均明显低于 A 组、C 组,而 EMX2明显高于 A 组、C 组,有显著差异(P <0.01)。结论 PCOS 促排大鼠发生早期妊娠丢失可能与种植窗期子宫内膜 HOXA10、整合素ανβ3、LIF 的低表达、EMX2的高表达有关；也可能与种植窗前期子宫内膜 HOXA10、整合素ανβ3、LIF、EMX2表达量异常有关。泰山磐石散可能通过上调种植窗期子宫内膜 HOXA10、整合素ανβ3、LIF,下调 EMX2的表达,提高子宫内膜容受性,减少早期妊娠丢失。
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地屈孕酮对多囊卵巢综合征促排妊娠大鼠早期妊娠结局的影响
目的:观察地屈孕酮对多囊卵巢综合征(PCOS)、经枸橼酸氯米芬(CC)促排卵妊娠大鼠早期妊娠结局及种植窗期子宫内膜同源框基因A10(HOXA10)、EMX2及整合素αvβ3的影响.方法:20只正常雌鼠自80日龄起子生理盐水灌胃后与雄鼠合笼,将妊娠大鼠作为正常妊娠组(A组).70只雌鼠予以脱氢表雄酮制作PCOS模型,自大鼠80日龄起予CC灌胃后与雄鼠合笼,选取其中24只妊娠大鼠随机分为PCOS妊娠组(B组)、PCOS妊娠+地屈孕酮组(C组).于妊娠第5天各组随机选取6只大鼠断头处死,留取子宫和子宫内膜标本,以半定量RT-PCR、Western blot检测各组大鼠子宫内膜HOXA10、EMX2及整合素αvβ3的表达;妊娠第8天将剩余大鼠断头处死,留取双侧子宫计算胚泡数量.结果:大鼠胚泡的着床率A组＞C组＞B组;3组平均胚泡着床数比较,差异有统计学意义(P＜0.05).子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3的mRNA及蛋白表达A、C组明显高于B组,差异有统计学意义(P＜0.001);而EMX2的mRNA及蛋白表达A组明显低于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.01),B、C组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:PCOS大鼠经促排卵治疗后种植窗期子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3的表达下调,EMX2的表达上调,可能是早期流产的原因之一;而地屈孕酮可能通过上调子宫内膜容受因子HOXA10、整合素αvβ3的表达减少早期妊娠丢失.
