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OmpA DNA疫苗文献资料
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禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗免疫效果的研究
目的:研究禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗在鸡体内诱导的免疫保护效果.方法:PCR扩增禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆入pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pOMPA,体外转染SP2/0细胞,RT-PCR和免疫荧光试验检测目的基因的转录及表达情况.动物免疫共分四组:pOMPA组、弱毒疫苗组、pCDNA3.1(+)空载体组和PBS对照组,每组15只4周龄鸡,除弱毒疫苗组外其他三组均肌注免疫三次,每次间隔两周,弱毒疫苗组仅首免时肌注1羽份/每只鸡.间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫鸡外周血淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA检测IFN～γ分泌情况,强毒攻击,计算免疫鸡存活数目及保护率.结果:体外转染检测结果表明pOMPA可在体外培养的细胞中表达目的蛋白.动物免疫后,DNA疫苗组和弱毒疫苗组血清抗体水平持续上升,与两对照组相比差异极显著(P＜0.01),且弱毒疫苗组血清抗体水平明显高于DNA疫苗组(P＜0.05).经提取的外膜蛋白(Omps)诱生后,两疫苗组的SI值极显著高于pCDNA3.1(+)组和PBS免疫组(P＜0.01),两疫苗组之间则无差别.两疫苗组免疫鸡外周血淋巴细胞产生的IFN-γ极显著高于两对照组(P＜0.01).强毒攻击后DNA疫苗组和弱毒疫苗组的保护率分别为60%和73.3%.结论:成功构建了禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗,该疫苗为动物提供一定的免疫保护力,但不够理想.
关键词： 禽多杀性巴氏杆菌 OmpA DNA疫苗 免疫应答 保护效果
