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  • 呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及鉴定

    作者:陈晓琦;徐葛林;王继麟;全家妩

    目的:建立能稳定分泌抗呼吸道合胞病毒(RSV-long株,国际标准株)单克隆抗体的杂交瘤细胞株.方法:杂交瘤技术制备单抗,鉴定各项特性.结果:培育出稳定分泌抗RSV 蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞5株.杂交瘤细胞株染色体数目在89~104条之间,其分泌的抗体分别属于鼠IgG1、IgG2a、IgG2b亚类,各种腹水单抗的荧光效价在1∶ 4 000~1∶ 16 000之间.一种单抗识别RSV 基质蛋白(M),两种单抗识别RSV 融合蛋白(F),另两种单抗识别RSV核衣壳蛋白(N).单抗中和效价高达1∶ 64.相加指数证实5种单抗识别不相关的抗原表位.用硫氰酸铵洗脱法比较了五种单抗相对亲和力的大小,依次为:1#>2#>4#>3#>5#.所有杂交瘤细胞株,经连续3个月培养及冻存半年后复苏,细胞生长良好,检测上清,其分泌抗体效价稳定.结论:已获得抗呼吸道合胞病毒的单克隆抗体,为RSV感染的早期诊断及进一步研究奠定了基础.

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