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HSP70－TKD诱导的NK细胞向肿瘤细胞迁移的实验研究
目的：研究HSP70－TKD诱导的自然杀伤细胞（ NK）体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法：用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞（ Peripheral blood mononuclear cell ，PBMC）至第10天加入2μg／ml TKD，4 d后用流式细胞仪检测NK细胞表面杀伤性受体CD94／NKG2C的表达情况；应用流式分选将胰腺癌细胞系Colo357和结肠癌细胞系CW2分为HSP70高表达细胞亚系Colo＋、CW2＋和HSP70低表达细胞亚系Colo－、CW2－；Transwell小室实验检测HSP70－TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的迁移能力，MTT法检测HSP70－TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的杀伤活性。结果：流式结果显示 NK细胞在干细胞培养基中培养14天可大量增殖，细胞纯度高达（92．50±1．25）％；经HSP70－TKD诱导后，NK细胞表面杀伤性受体CD94／NKG2C的表达明显增加；经流式分选后，Colo＋、Colo－细胞表面HSP70的表达分别为（78．2±2．2）％和（27．3±1．2）％，而CW2＋、CW2－细胞表面HSP70的表达分别为（91．1±2．5）％和（18．2±1．0）％；HSP70－TKD诱导的NK细胞对Colo＋迁移率为（68．6±2．8）％，明显高于对Colo－的迁移率（22．8±1．5）％，NK细胞对CW＋迁移率为（73．5±2．7）％，明显高于对CW2－的迁移率（18．2±1．3）％；HSP70－TKD诱导的NK细胞对Colo＋、Colo－的杀伤活性有显著性差异，当效靶比为20∶1时，杀伤活性分别为（61．2±3．0）％、（24．5±1．5）％， NK对CW2＋、CW2－的杀伤活性有显著性差异，当效靶比为20∶1时，杀伤活性分别为（63．8±3．2）％、（22．4±1．8）％。结论：HSP70－TKD诱导的NK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞，在体外易向HSP70表达阳性的肿瘤细胞迁移。
