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  • 骺板软骨细胞的冻存及复苏

    作者:尹飞;郭丽;武汉;王金成;高中礼;刘美含;段德生

    目的研究骺板软骨细胞冻存的方法.方法取对数生长期的骺板软骨细胞,加入配制好的冻存液(冻存液A:培养液与DMSO;冻存液B:含5%小牛血清的培养液与DMSO;冻存液C:含20%小牛血清的培养液与DMSO;冻存液D:小牛血清与DMSO混合;其中DMSO终浓度均为10%.),冻存.细胞复苏后用台盼蓝拒染试验检测细胞存活率.然后接种于培养皿中,采用苏木-伊红染色和甲苯胺蓝染色,观察细胞形态及合成糖胺多糖的能力.结果细胞活率为:A冻存液70%,B冻存液75%,C、D两种冻存液元明显差别,分别为89%和92%.复苏的细胞贴壁时间延迟,但培养72小时以后,细胞活力明显增强.甲苯胺蓝异染提示,经冷冻保存后软骨细胞仍能保持合成异染基质(糖胺多糖)的能力.结论本实验冻存、复苏的方法结果稳定,可用于保存骺板软骨细胞.

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