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内质网应激相关蛋白在大鼠急性脊髓损伤中的表达及其意义
目的：探讨大鼠急性脊髓损伤处内质网应激相关蛋白（ CHOP）的表达及细胞凋亡变化与内质网应激对于急性脊髓损伤的相关性。方法选取56只健康SD大鼠随机分为实验组与对照组，每组28只，然后按损伤时间点将每组分为3、24 h、3、7 d四时点组（每组7只），每组均在其脊髓损伤后计算时间。实验组采用 Allen 法制作大鼠急性脊髓损伤动物模型，而对照组只切开椎板不损伤脊髓。运用改良 Tarlov评分法评价其神经功能；进行心脏灌注和免疫组织学染色，然后观察其组织学形态和测定累积光密度检测 CHOP表达情况，并应用缺口原位末端标记法（ TUNEL）测定平均光密度检测神经细胞凋亡情况。结果对照组各大鼠均未见明显运动功能损害，而实验组出现不同程度的下肢功能障碍，实验组大鼠后肢运动功能障碍在3 d时明显，另外各时间点对照组大鼠改良Tarlov评分差别均具有统计学意义；组织学检查发现实验组3 h时大鼠脊髓组织主要以坏死细胞为主，1 d是凋亡细胞较多，3 d时凋亡细胞多；各时间点实验组CHOP表达与对照组均具有统计学差异；实验组脊髓损伤后3 h与1 d CHOP表达差异无统计学意义，1 d与3 d、3 d与7 d CHOP表达均具有统计学差异，其中3 d时CHOP表达高；实验组3 h时细胞凋亡情况与对照组无统计学差异，而1、3、7d时两组细胞凋亡均具有统计学差别；实验组3h和1d、1d和3d，3d和7d之间细胞凋亡均具有统计学差别，其中3d时细胞凋亡明显；CHOP表达与细胞凋亡相关分析得到 Pearson相关系数为0．729，差异具有统计学意义。结论急性脊髓损伤能够诱导内质网相关蛋白CHOP表达，内质网应激诱导的神经细胞凋亡可能与CHOP表达升高有关。
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内质网应激激活剂上调GRP78表达与肺癌A549细胞对顺铂的敏感性
目的 探讨内质网应激激活剂衣霉素(tunicamycin,TM)与肺癌A549细胞对顺铂(cisplatin,DDP)的敏感性的关系及其机制.方法 体外培养肺癌A549细胞,并应用不同浓度的DDP(0、10、20、50 μmoVL)和/或TM(0、1、2、4 μg/ml)处理肺癌A549细胞.MTY法检测肺癌A549细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blot检测内质网应激相关蛋白-葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和凋亡相关蛋白-激活型半胱天冬酶-7(Cleaved caspase7)的表达水平.结果 (1)不同浓度DDP作用于肺癌A549细胞24h后,细胞存活率随DDP浓度的增加而下降,A549细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-7的表达水平随DDP浓度增加而增加(P均＜0.01);(2)不同浓度TM作用A549细胞24h后,随着TM浓度的增加,GRP78的表达水平递增(P＜0.05);(3)TM联合20 μmol/L的DDP处理A549细胞24h后,与单纯TM组和单纯20 μ.mol/L的DDP组比较,A549细胞存活率降低,面细胞凋亡率明显增加,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01);(4)TM联合20 μmol/L的DDP处理A549细胞24 h后,与单纯20 μmol/L的DDP组比较,TM联合DDP组Cleaved caspase-7表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TM可促进DDP诱导的肺癌A549细胞存活率的降低、凋亡率的增加和凋亡相关蛋白Cleaved caspase-7的表达,提示TM可能通过上调GRP78增加肺癌A549细胞对DDP的敏感性,联合应用TM和DDP有望成为治疗肺癌的新策略.
