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  • 电泳凝胶与转膜的原位切割方法

    作者:程熠;洪敏;高琳;李奇

    目的:建立简易的快速分离高活性纯度酶以及用于氨基酸测序的转膜方法.方法:以考马斯亮蓝R-250的磺基水杨酸水基染色液,确定聚丙烯酰胺凝胶与转印到PVDF膜的蛋白电泳带的位置,以等位切割方法获得未受染色液污染的高纯度的活性酶组分以及转印的PVDF膜.结果:以适当浓度的考马斯亮蓝R-250的磺基水杨酸水基染色液染色,能保证聚丙烯酰胺凝胶和PVDF膜在染色前后保持等长.结论:等位切割方法能避免目前常见的如SDS、染色液组分对酶活性以及测序结果造成的干扰.

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