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RNA干扰IDH2基因对HCT-8细胞增殖能力的影响
目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据.方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HC-8细胞空白对照组.构建靶向基因IDH2的siRNA真核绿色荧光载体重组质粒PGPU6/GFP/NeoIDH2,利用FuGENE HD转染剂转染HCT-8细胞,通过荧光定量PCR检测IDH2 mRNA的表达情况及MTT法检测结肠癌HCT-8细胞增殖变化.结果:在荧光显微镜下进行细胞计数,细胞转染率为74％.实时荧光定量PCR检测,siRNA重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2对IDH2基因表达的抑制率为85.02％,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).MTT检测,干扰质粒转染组细胞的增殖能力明显低于空白对照组(P＜0.05).结论:抑制IDH2基因的表达可影响结肠癌细胞的增殖能力,提示IDH2基因在结肠癌的发生发展中起重要作用,抑制IDH2基因的表达可能成为一种治疗结肠癌的方法.
关键词： RNA干扰 IDH2基因 人结肠癌HCT-8细胞 -
血液肿瘤患者IDH1/IDH2基因突变发生率及其血液病分布特点研究
目的 研究血液肿瘤患者IDH1/IDH2基因突变发生率和其血液病的分布特点.方法 选取300例不同病情的血液患者骨髓的样品,其中245例是血液肿瘤患者,55例是非血液肿瘤患者,对比检查IDH2和IDH1基因是否在血液肿瘤患者中有突变行为.结果 实验共发现了7个错义的突变基因,其中2个为IDH2基因突变,4个为IDH1基因突变;还有2个IDH1同义突变.4个IDH1的突变类型是:199M、R132C、R131D及R132H,前3个突变患者都出现在3例急性髓系的白血病患者中,后1例出现在急性淋巴细胞的白血病患者中.2个IDH2的错义突变类型是:P167R和R172K,这2例也都出现在急性髓系的白血病患者中.在发生IDH1错义基因突变的4例患者中,其体内白细胞的计数明显升高,且患者年龄均大于60岁.在发生IDH2基因突变的2例患者中,其体内白细胞的计数明显降低,且患者的年龄均小于60岁.结论 96例的急性白血病患者的检测中,共发现了9例突变患者,其IDH的突变率是9.3％,且7例发生于急性髓系的白血病患者中,说明急性髓系的白血病的发病和IDH的突变有紧密的联系.
