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人热敏瞬时受体通道1基因转染对猫角膜内皮细胞P27蛋白表达的影响
目的:探讨人热敏瞬时受体通道1(TRP1)基因转染对猫角膜内皮细胞P27蛋白表达的影响,探讨热敏TRP1基因对角膜内皮细胞增殖周期的作用,为该基因应用于人角膜内皮细胞提供理论依据.方法:将20只健康足月幼猫随机分为实验组和对照组,每组10只,麻醉后取角膜内皮细胞进行培养,培养后实验组细胞通过脂质体介导的方法转染人热敏TRP1基因,对照组采用5.0 μL PBS代替表达载体加入培养基.RT-PCR观察人热敏TRP1基因mRNA表达水平,Western blotting观察猫角膜内皮细胞内P27蛋白的表达.继续培养96 h观察目的基因转染对细胞分裂再生活性的影响.结果:细胞培养、加热后钙离子流入明显增多;人热敏TRP1基因转染后RT-PCR结果显示.实验组条带密度显著高于对照组(t＝2.21,P＝0.037);Western blotting结果显示,实验组P27蛋白表达显著高于对照组,差异有统计学意义(t＝ 2.53,P＝0.021);实验组和对照组有丝分裂指数、G1期细胞比例差异均有统计学意义(x2 ＝3.26,x2＝4.18,P＜0.05).结论:人热敏TRP1基因转染可以增加猫角膜内皮细胞P27蛋白表达,抑制角膜内皮细胞增殖.
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人热敏瞬时受体通道1基因转染对兔角膜内皮细胞的影响
目的：探讨人热敏瞬时受体通道1基因转染对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响。
方法：研究组为人热敏瞬时受体通道1基因通过脂质体介导的方法转染到体外培养的兔角膜内皮细胞中，采用MTT方法观察对细胞增殖的影响，免疫组织化学染色法和计算机图像分析系统检测对细胞增殖细胞核抗原（ proliferation cell nucleus antigen，PCNA）表达的影响。
结果：热敏瞬时受体通道1基因转染后内皮细胞增殖增加，实验组与对照组比较差异有统计学意义（t＝3．01，P＝0．013）；实验组细胞PCNA表达明显增加，与对照组比较差异有统计学意义（ t＝3．21，P＝0．007）。
结论：人热敏瞬时受体通道1基因转染可以促进兔角膜内皮细胞增殖。
