首页 > 文献资料
-
单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B基因疫苗的构建及其诱导小鼠细胞免疫应答
目的:构建、制备单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B DNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答效果.方法:利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1 gB14～507氨基酸序列的一段基因.定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定.于BALB/c鼠注射免疫3次,抗体分析CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)/碘化丙碇(PI)双标记的流式细胞计数法检测CTL活性.结果:PCR及测序鉴定结果显示,插入的克隆基因与GenBank中HSV-1F株gB基因序列一致,证实了HSV-1 gBt核酸疫苗的构建;pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD4+T细胞数较空质粒(pcDNA3)对照组和生理盐水对照组增加,CTL活性也较对照组明显增强,但是pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD8+T细胞、CD4+/CD8+T细胞比值与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论:HSV-1 gBt核酸疫苗诱导较强的细胞免疫应答.
-
HSV-1截短gB基因DNA疫苗的构建及初步鉴定
目的为有效预防单纯疱疹Ⅰ型病毒(HSV -1)感染,给多价DNA疫苗的构建奠定基础,构建表达截短HSV-1?gB糖蛋白的DNA疫苗.方法用PCR技术从HSV-1基因组中扩增出编码HSV-1?gB糖蛋白1-51 7氨基酸序列的一段基因序列,通过pGEM-T中介载体,将其插入到真核表达质粒pcDNA?3 .1(+)的CMV启动子下游.结果构建的重组真核表达质粒可在动物体内正确表达目的基因,对HSV- 1病毒攻击具有免疫保护作用.结论本研究对截短HSV-1?gB基因DNA疫苗进行了初步的探索性研究,也为多价HSV-1?DNA疫苗的构建奠定了基础.
