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猪Ⅱ型圆环病毒文献资料
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表达猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因重组鸡痘病毒的构建与鉴定
目的 构建表达猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)ORF2基因的重组鸡痘病毒.方法 将PCV2 ORF2基因插入到转移载体pUTAL复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTA-ORF2,将该质粒与鸡痘病毒野生株282-E4共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组.经BrdU加压筛选重组鸡痘病毒,采用RT-PCR和间接免疫荧光法进行鉴定.结果 重组鸡痘病毒感染的CEF经RT-PCR可扩增出260 bp的目的 基因,间接免疫荧光检测可见特异性黄绿色荧光,表明目的 基因在重组鸡痘病毒中得到表达.结论 已成功构建了1株表达PCV2 ORF2基因的重组鸡痘病毒.
